ارزیابی اثر ترکیب اکسید گرافن-گلد بر روی رده سلولی hepg2

سابقه و هدف: یکی از مهم ترین تاثیرات نانو مواد بر سلول ها، القای فرآیند مرگ برنامه ریزی شده سلولی (آپوپتوز) می باشد. هدف از این مطالعه، بررسی اثر سمیت نانو ذره اکسید گرافن - طلا و ارزیابی بیان ژن کاسپاز 3 در رده سلول های سرطانی کبد hepg2 می باشد.مواد و روش‌ها: در این مطالعه تجربی رده سلولی هپاتو سلولار کارسینوما (hepg2) از انستیتو پاستور تهران تهیه شد .از سلول های تیمار شده با غلظت های µg/ml 10 تا 500 از goldr - go و تیمار نشده به عنوان کنترل استفاده گردید. میزان بیان ژن کاسپاز 3 و میزان زنده مانی سلول ها در سه گروه کنترل c، گروه a و b در زمان های 24 و 48 ساعت بررسی و مقایسه شد. اثر غلظت به روش xtt و رنگ آمیزی آکریدین اورنج اتیدیوم بروماید بررسی شد. سنجش بیان ژن کاسپاز 3 به صورت کمی relative quantification با استفاده از تست real time pcr انجام شد.یافته‌ها: بر اساس نتایج xtt مقادیر ec20، ec50، ec80 در زمان 24 ساعت به ترتیب µg/ml 386/420، 90/680، 24/151 و در زمان 48 ساعت g/mlµ 358/146، 89/536، 22/384 محاسبه شد. بررسی میزان تغییر سطح بیان ژن کاسپاز 3 در این غلظت ها در مقایسه با سلول های تیمار نشده در زمان های 24، 1/022±3/436difference between means fold change±sem=  و 48 ساعت 0/02±4/054 نشان داد که به صورت معنی داری میزان سطح بیان ژن تغییر می کند. میزان زنده ماندن سلول های کنترل (c) در مقایسه با سلول های تیمار شده با غلظت های بالاتر از 50 میکروگرم در میلی لیتر (b) افزایش نسبی دارد که از لحاظ آماری معنی دار است (0/0001>p). بررسی با رنگ آمیزی ao/eb برای تعیین میزان آپوپتوز با بیشتر شدن دوز میزان آپوپتوز بیشتری را نشان داد.نتیجه‌گیری: نتایج مطالعه نشان داد که در کاربرد این نانو ذره باید از زمان های کوتاه تر و غلظت های پایین تر استفاده کرد.

an evaluation of the effect of graphene oxide-gold nanocomposite on hepg2 cell line

background and objective: one of the most important effects of nanomaterials on cells is the induction of programmed cell death (apoptosis). the aim of this study is to investigate the toxicity of graphene oxidegold nanoparticles and to evaluate the expression of caspase 3 gene in hepg2 liver cancer cell line.methods: in this experimental study, hepatocellular carcinoma cell line (hepg2) was prepared from pasteur institute of iran. cells were treated with concentrations of 10 to 500 µg/ml goldrgo and untreated cells were used as control. the level of caspase 3 gene expression and cell viability were investigated and compared within 24 and 48 hours in three groups of a, b and control (c). the effect of concentration was investigated by xtt method and acridine orange ethidium bromide staining. caspase 3 gene expression was measured by relative quantification using real time pcr test.findings: based on xtt results, ec20, ec50, ec80 values were calculated as 386.420, 90.680, 24.151 µg/ml in 24 hours and 358.146, 89.536, 22.384 µg/ml in 48 hours. examining the level of caspase 3 gene expression change in these concentrations compared to untreated cells showed mean fold changes (mean±sem) of 3.436±1.022 in 24 hours and 4.054±0.02 in 48 hours, according to which the level of gene expression changes significantly. the viability of control cells (c) compared to cells treated with concentrations higher than 50 μg/ml (b) has a relative increase, which was statistically significant (p<0.0001). examination with ao/eb staining to determine the level of apoptosis showed a higher level of apoptosis with increasing dose.conclusion: the results of the study showed that shorter times and lower concentrations should be used in the application of this nanoparticle.