اثرات سایتوتوکسیک و آپوپتوتیک مهار c-myc توسط 10058-f4 بر سلول های لوسمی پرومیلوسیتیک حاد

سابقه و هدف: cmyc نقش بسیار مهمی در کنترل تکثیر، آپوپتوز و تمایز سلول ها بازی می کند. با توجه به دخالت cmyc در تنظیم طیف گسترده ای از عملکردهای داخل سلولی و بر اساس نقش آن در پاتوژنز لوسمی پرومیلوسیتیک حاد (apl)، در این مطالعه با هدف بررسی اثر ضد لوسمی 10058f4، به عنوان یک مهار کننده شناخته شده cmyc، در سلول های hl60 مشتق از apl انجام شد. مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی، برای بررسی اثرات سایتوتوکسیک 10058f4 در لوسمی پرومیلوسیتیک حاد، رده سلولی hl60 (تهیه شده از انیستتو پاستور ایران) با دوزهای مختلف مهار کننده (50، 100،150 و 200 میکرومولار) تیمار گشته و سپس در فواصل زمانی 24 و 36 ساعت، درصد زنده مانی، شمارش سلولی، فعالیت متابولیک و القاء آپوپتوز به ترتیب بررسی گردید. علاوه بر این، برای بررسی مکانیسم‌ های مولکولی عملکرد 10058f4 تغییرات رونویسی از ژن های مرتبط با آپوپتوز به کمک روش realtime pcr مورد مطالعه قرار گرفت.یافته ها: نتایج نشان داد که مهار cmyc با استفاده از 10058f4 در دوزهای 150 و 200 میکرومولار در 24 ساعت به ترتیب موجب کاهش 4 ±38% و 3/2 ±49% رشد سلول های hl60 نسبت به گروه کنترل می‌گردد (0/05>p). همچنین اثرات سایتوتوکسیک دارو، ناشی از توقف سلول ها در فاز g1 و القاء آپوپتوز می باشد؛ چرا که درصد سلول های رنگ گرفته با annexine/pi در سلول های تیمار شده با دوز 100 میکرومولار پس از 24 ساعت، در مقایسه با گروه کنترل 31% افزایش یافته بود (0/05>p).نتیجه گیری: در این مطالعه، کارآمدی 10058f4 در سلول های hl60 کاملاً مشخص شد.

Cytotoxic and Apoptotic Effects of C-Myc Inhibition by 10058-F4 on Acute Promyelocytic Leukemia Cells

BACKGROUND AND OBJECTIVE: CMyc plays a very important role in controlling cell proliferation, apoptosis and differentiation. Due to the involvement of cMyc in the regulation of a wide range of intracellular functions and based on its role in the pathogenesis of acute promyelocytic leukemia (APL), the present study was conducted to investigate the antileukemia effect of 10058F4, as a known cMyc inhibitor, on APLderived HL60 cells.METHODS: In this experimental study, to evaluate the cytotoxic effects of 10058F4 in acute promyelocytic leukemia, HL60 cell line (prepared from Pasteur Institute of Iran) was treated with different doses of inhibitor (50, 100, 150 and 200 mu;M) and then in 24 and 36 hours intervals, survival rate, cell count, metabolic activity and induction of apoptosis were respectively evaluated. In addition, transcriptional changes of apoptosisrelated genes were studied by realtime PCR to investigate the molecular mechanisms of function of 10058F4.FINDINGS: The results showed that inhibition of cMyc by 10058F4 at doses of 150 and 200 mu;M in 24 hours reduced the growth of HL60 cells by 38 ±4% and 49 ±3.2%, respectively, compared to the control group (p<0.05). In addition, the cytotoxic effects of the drug are due to the arrest of cells in the G1 phase and the induction of apoptosis; Because the percentage of cells stained with Annexin V/PI in cells treated at a dose of 100 mu;M after 24 hours increased by 31% compared to the control group (p<0.05).CONCLUSION: In this study, the efficacy of 10058F4 in HL60 cells was fully established.