تاثیر امگا3 برمیزان متیلاسیون dna اسپرم وساختار هیستولوژیک بیضه رت بعد از درمان با بلئومایسین، اتوپوساید وسیس پلاتین

سابقه و هدف: در طی روند درمان سرطان، شیمی درمانی علاوه بر اثرات مخرب بر روی سلولهای تومری به بافتهای سالم نیز آسیب می رساند و همچنین تعادل سطح اکسیدان و آنتی اکسیدانها بهم می خورد. لذا هدف از این مطالعه بررسی تاثیر امگا3 به عنوان آنتی اکسیدان بر متیلاسیون dna اسپرم و ساختار بافت بیضه رت بعد از درمان با داروی ترکیبی شیمی درمانی، ترکیب بلئومایسین، اتوپوساید وسیس پلاتین(bleomycin, etoposide, cisplatine: bep) می باشد.مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی 40 سر رت نر به صورت تصافی به چهار گروه 10 تایی کنترل،bep، bep +امگا3 و امگا3 تقسیم شدند. گروه کنترل با نرمال سالین 0/9%، به صورت داخل صفاقی و به مدت 18 هفته تیمار شدند. گروه دوم(bep)، ابتدا به مدت 9 هفته نرمال سالین 0/9% را به صورت داخل صفاقی دریافت نمودند. سپس به مدت 9هفته، دارویbep را با دوزmg/kg 5/1، داروی سپس پلاتین و اتوپوساید را با دوز mg/kg 5/7 به صورت خوراکی از طریق لوله دریافت 5 روز اول هفته و دو روز استراحت و همچنین داروی بلئومایسین را با دوز mg/kg75 به صورت دو روز اول هفته و پنج روز استراحت، دریافت کردند، گروه سوم نیز با داروی bep به روش قبلی تیمار شده و سپس امگا3 را در 9 هفته دوم، به عنوان آنتی اکسیدان به میزان mg/kg300 روزانه و به صورت خوراکی از طریق لوله دریافت کردند. میزان متیلاسیون dna اسپرم و ساختار بافت بیضه شامل لوله های منی ساز و ضخامت غشای پایه به ترتیب با کمک رنگ آمیزی ایمنوفلورسانس وپریودیک اسید شیف (pas) پس از دوره درمان 18 هفته در گروههای مختلف بررسی شد.یافته ها: میانگین درصد متیلاسیون dna اسپرم در گروه تیمار شده با bep (3/11 ±52/22) به طور معنی داری در مقایسه با گروه کنترل (2/92 ±81/80) کاهش یافت (0/001>p). درحالیکه میانگین درصد متیلاسیون dna اسپرم با مصرف امگا3 بعد از درمان با bep (2/18 ±67) در مقایسه با گروهbep به طور معنی داری افزایش یافت (0/01>p). در بررسی بافت بیضه با میکروسکوپ نوری، در گروه تیمار با bep تعداد سلول های اسپرماتوگونی(1/56 ±44/95)، اسپرماتوسیت اولیه(1/45 ±47/60) و همچنین ضخامت اپی تلیوم لوله های منی ساز (5/64 ±145/5) و غشای پایه (0/29 ±7/07) در مقایسه با گروه کنترل کاهش داشت (0/001>p). در حالیکه با مصرف امگا3 پس از درمان با bep، بهبود معنی داری در تعداد سلولهای رده زایا و ضخامت اپیتلیوم لوله های منی ساز وغشای پایه مشاهده شد(0/01>p).نتیجه گیری: براساس نتایج این مطالعه امگا3 می تواند به عنوان یک آنتی اکسیدان اثرات سمیت سلولی ناشی از داروهای شیمی درمانی را بهبود بخشد و پیشنهاد می شود بعد از شیمی درمانی برای بیماران سرطانی استفاده شود تا سمیت سلولی ناشی از این داروها را کاهش دهد.

Effect of Omega-3 on Rat Sperm DNA Methylation and Histological Structure of Testis after Treatment with Bleomycin, Etoposide and Cisplatin (BEP)

BACKGROUND AND OBJECTIVE: During the cancer treatment course, in addition to the destructive effects on the tumor cells, chemotherapy also damages healthy tissues and disrupts the balance of oxidant and antioxidant levels. The present study was conducted to evaluate the effect of omega3 on sperm DNA methylation and histological structure of rat testis after treatment with combination chemotherapy using bleomycin, etoposide and cisplatin (BEP).METHODS: In this experimental study, 40 male rats were randomly divided into four groups of control, BEP, BEP+omega3 and omega3 (n=10). The control group was treated with 0.9% normal saline intraperitoneally for 18 weeks. The second group (BEP) first received 0.9% normal saline intraperitoneally for nine weeks. Then, it received BEP at 5.1 mg / kg for nine weeks, received etoposide and cisplatin at 5.7 mg/kg through gavage on days 15 of each week, and then received bleomycin at 75 mg/kg on days 2 of each week. The third group was gavaged with 0.9% saline for 9 weeks and then, orally received 300 mg/kg/day omega3(capsule containing 1000 mg, 18% EPA and 12% DHA) for 9 weeks and in BEP + omega3 group treated with BEP based on the same method and then orally received 300 mg/kg omega3 as an antioxidant for the second nine weeks daily. Sperm DNA methylation and histological structure of rat testis including seminiferous tubules and basement membrane thickness were respectively evaluated by immunofluorescence staining and Periodic acid ndash; Schiff (PAS) after 18 weeks of treatment in all groups. FINDINGS: The mean percentage of sperm DNA methylation in the BEPtreated group (52.22 ±3.11) was significantly decreased compared to the control group (81.80 ±2.92) (p<0.001). However, the mean percentage of sperm DNA methylation increased significantly with omega3 use after treatment with BEP (67 ±2.18) compared with BEP group (p<0.01). In light microscopy of testicular tissue, the number of spermatogonial cells (44.95 ±1.56), primary spermatocytes (47.60 ±1.45) as well as the epithelial thickness of seminiferous tubules (145.5 ±5.64) and basement membrane (7.07 ±0.29) decreased in the BEPtreated group in comparison with control group (p<0.001). However, the use of omega3 after treatment with BEP significantly improved the number of germ cells and epithelial thickness of the seminiferous tubule and basement membrane (p<0.01).CONCLUSION: Based on the results of this study, omega3 as an antioxidant can improve the cytotoxic effects of chemotherapy drugs and it is recommended to be used for cancer patients after chemotherapy to reduce the cytotoxicity of these drugs.