ایمنی زائی آنتی ژنهای نوترکیب سیستم ترشحی نوع 3 و زیر واحد اتصالی سم شبه شیگا از باکتری e.coli o157 h7

سابقه و هدف: انتروهموراژیک اشرشیاکلی (ehec) باعث اسهال و سندرم همولیتیک اورمیک می شود. با توجه به خطرات ناشی از درمان آنتی بیوتیکی در عفونت ehec o157: h7، واکسن ها روشی امید بخش برای پیشگیری از عفونت را ارائه می کنند. هدف از این مطالعه بررسی ایمنی زایی پروتئین های نوترکیب intimin،espa وstx2b در برابر عفونت باکتری e.coli o157 h7 می باشد.مواد و روش ها: در این مطالعه تحقیقی، بیان پروتئین های نوترکیب intimin، espa وstx2b در bl21 de3 e.coli باiptg القا شد. پروتئین های نوترکیب با وسترن بلات ارزیابی و کروماتوگرافی تمایلی ni-nta تخلیص گردید. ایمنی زایی زیرپوستی و درون صفاقی موش ها انجام و تیتر آنتی بادی توسط elisa تعیین شد. موشها باخوراندن باکتری آلوده و ریزش باکتری و مرگ و میر موش ها بررسی گردیدند. یافته ها: آنالیز sds-page بیان پروتئین ها با وزن 11،17 و 35 کیلودالتون را نشان داد. پروتئین های نوترکیب توسط وسترن بلات تایید شد. تیتر پایانی الیزا برای پاسخ هومورال به espa، intimin وstx2b ، 25600 بود. ریزش باکتری در موش های ایمن تا cfu/ml 2 10 و مرگ و میر نیز تا 60 درصد کاهش یافت.نتیجه گیری: نتایج نشان داد که پاسخ ایمنی علیه پروتئین های intimin ، espa وstx2b باعث حفاظت حیوان در چالش با e.coli o157: h7 می شود.

Immunization Evaluation of Type III Secretion System Recombinant Antigens and Shiga Like Toxin Binding Subunit of E. coli O157:H7

BACKGROUND AND OBJECTIVE: Escherichia coli enterohemorrhagic (EHEC) causes diarrhea, hemolysis colitis, and uremic hemolytic syndrome. Due to the dangers of antibiotic treatment in the EHEC O157: H7 infection, vaccines offer a promising way to prevent infection. The purpose of this study was to investigate the immunity of recombinant proteins Intimin, EspA and Stx2b against infection of E. coli O157 H7.METHODS: In this research study, expression of recombinant Intimin, EspA and Stx2b proteins E.coli BL21 DE3 was induced with IPTG. Recombinant proteins were examined by Western Blot and purified using the affinity NiNTA chromatography. Subcutaneous and intraperitoneally immunization of mice was performed and the antibody titer was determined by ELISA. The mice were orally infected with bacteria and the bacterial loss and mortality of the mice were examined.FINDINGS: SDSPAGE analysis showed expression of proteins with 11,17 and 34 kDa molecular weight. The recombinant proteins were confirmed by Western Blot. ELISA end point titer for humoral response to EspA, Intimin and Stx2b was 25600. The loss of bacteria in mice was 102 cfu / ml and mortality rate were reduced to 60 Percent.CONCLUSION: The results showed that immune response against EspA, Intimin and Stx2b proteins protects animals against challenges using E. coli O157: H7.