میزان بیان پلی‌مورفیسم D299g و T399i ژن Tlr4 در رده سلولی سرطان کولورکتال به روش فلوسایتومتری

زمینه و هدف : گیرنده‌های شبه toll (tlrs) به عنوان مهم‌ترین گیرنده‌ها در ایمنی ذاتی شناخته شده‌اند. گیرنده tlr4 به عنوان گیرنده اصلی در شناسایی لیپوپلی‌ساکارید (lps) باکتری‌های گرم منفی عمل می‌کند. دو پلی‌مورفیسم rs4986790) d299g (snp و (snp rs4986791) t399i در ژن این گیرنده موجب کاهش پاسخ‌دهی به lps می‌شود. این مطالعه به منظور تعیین میزان بیان پلی‌مورفیسم‌های مختلف ژن tlr4 در رده سلولی سرطان کولورکتال ht29 ، hct116 و caco2 به روش فلوسایتومتری انجام شد.روش بررسی : در این مطالعه آزمایشگاهی انتقال پلاسمید حاوی ژن واریته‌های مختلف شامل flag-tagged-tlr4وحشی،flag-tagged d299g و flag-tagged t399i موتان به سلول‌های hct116 توسط معرف turbofect صورت گرفت. راندمان انتقال ژن توسط پلاسمید gfp ارزیابی شد. میزان بیان واریته‌های مختلف tlr4 در سلول‌های دریافت کننده ژن‌ها از طریق فلوسایتومتری بررسی شد. داده‌ها با استفاده از نرم‌افزار آماری spss-11.5 و آزمون chi-square تجزیه و تحلیل شدند.یافته‌ها : رده‌های سلولی ht29 و caco2گیرنده tlr4 را در سطح پایینی بیان کردند. در حالی که سلول‌های hct116 قبل از انتقال پلاسمید، ژن tlr4 را در سطح قابل ردیابی به روش فلوسایتومتری بیان نکردند. راندمان انتقال ژن gfp به داخل سلول‌های hct116 به‌وسیله آنالیز میکروسکوپی و فلوسایتومتری حدود 80 درصد اندازه‌گیری شد. براین اساس میزان بیان tlr4و پاسخ‌دهی به lps در سلول‌هایی که ژن واریته وحشی tlr4 را دریافت کردند؛ به‌طور معنی‌داری بیشتر از سلول‌هایی بود که ژن واریته موتان را دریافت کردند (05/0p < ).نتیجه‌گیری : سطح پایین بیان tlr4 روی سلول‌های دارای نوع موتان گیرنده نشان داد که این پلی‌مورفیسم‌ها روی بیان گیرنده در سلول‌های سرطان کولون اثر دارند.