روش‌های ارزیابی کروماتین اسپرم در ناباروری

یکی از رخدادهای اصلی اسپرمیوژنز جایگزینی هیستون‌ها با پروتئین‌های کوچکی به نام «پروتامین» است. این پدیده منجربه تراکم کروماتین در هسته اسپرم و محافظت از آن در برابر آسیب‌های احتمالی می‌شود. امروزه تست‌هایی مانند رنگ‌آمیزی آنیلین‌بلو (ab)، تولویدین‌بلو (tb) و رنگ‌آمیزی کرومایسین (cma3) a3 بر‌اساس ویژگی‌های مختلف برای ارزیابی تراکم کروماتین اسپرم استفاده می‌شود. برای ارزیابی قطعه قطعه شدن dna در اسپرم، چندین تست نظیر 8-هیدروکسی-2-دئوکسی گوانوزین (8-ohdg)، tunel ، comet ، scsa ، scd و  acridine orange معرفی شده‌ است که به‌طور مستقیم و غیرمستقیم آسیب dna را ارزیابی می‌کنند. مقاله‌های منتشر شده توسط محققان در پایگاه‌های pubmed و google scholar و نیز کتب مرتبط از سال 2007 تا 2022 بر‌ اساس کلید واژه‌های 8-ohdg ، tunel، comet ، scsa ، scd وacridine orange  جمع‌آوری و مورد بررسی قرار گرفتند. تا به‌حال مقالات متعددی در سطح درمان و تحقیقات بر روی تست‌های کروماتین اسپرم انجام شده است؛ اما تعداد موارد بررسی شده تاکنون کم بوده و همچنین در مطالعات گوناگون از نمونه‌های متفاوت اسپرمی استفاده شده و حد آستانه در تست‌های مختلف، متفاوت بوده است. در ویرایش ششم کتاب who به این موضوع پرداخته شده است که هر آزمایشگاه حد آستانه مشخص خود را دارد. لذا در این مقاله مروری، روش‌های رایج ارزیابی بسته‌بندی کروماتین و آسیب dna معرفی شده و مزایا و معایب هر یک از این تست‌ها بر اساس آخرین دستاوردها در زمینه ناباروری مورد بحث و بررسی قرار می‌گیرد.

sperm chromatin evaluation methods in infertility

one of the main spermatogenesis events is the replacement of histones with small proteins called protamines, which leads to chromatin’s condensation in the sperm nucleus and protects it against possible damage. today, tests such as aniline blue (ab), toluidine blue (tb), and chromomycin a3 (cma3) staining are used based on different characteristics to evaluate sperm chromatin compaction. for the assessment of dna fragmentation in sperm, several tests such as 8-hydroxy-2-deoxyguanosine (8-ohdg), tunel, comet, sperm chromatin structure assay (scsa), sperm chromatic dispersion (scd), and acridine orange have been introduced that directly and indirectly assay dna damage. the articles in pubmed and google scholar, as well as related books, from 2007 to 2022, were collected and reviewed based on keywords 8-ohdg, tunel, comet, scd, and acridine orange. so far, many studies have been conducted at the treatment level and on sperm chromatin tests, but the number of cases published so far is limited. various sperm samples have been used in different studies, with different threshold limits in the tests. the sixth edition of the world health organization (who) book notes that each laboratory has its threshold limit. therefore, in this review study, common methods of evaluating chromatin packaging and dna damage are introduced, and the advantages and disadvantages of each test are discussed based on the latest achievements related to infertility.