جداسازی، کلونینگ و بیان سوپر آنتی ژن spe استرپتوکوک دیس گالاکتیه با روش sds page در بیماران مبتلا به پسوریازیس

زمینه و هدف: استرپتوکوک‌ها باکتری‌های گرم مثبت و بی‌هوازی هستند که به صورت زنجیره به دنبال هم قرار گرفته و از منابع متفاوت جدا می‌شوند. پروتئین spea یکی از فراورده‌های میکروبی است که از منابع مختلفی از جمله استرپتوکوکوس دیس گالاکتیه قابل استخراج است. پسوریازیس یک بیماری شایع، مزمن و عود کننده است که به خصوص در مراحل پیشرفته می‌تواند باعث عوارض متعدد جسمی و روحی در فرد بیمار گردد. این مطالعه به منظور جداسازی، کلونینگ و بیان سوپر آنتی ژن spe استرپتوکوک دیس گالاکتیه با روش sds page در بیماران مبتلا به پسوریازیس انجام شد.روش بررسی: این مطالعه توصیفی آزمایشگاهی روی 60 نفر (26 مرد و 34 زن) مراجعه کننده به آزمایشگاه تشخیص طبی (27 نفر دارای پسوریازیس ناشی از عامل استرپتوکوک دیس گالاکتیه و 33 نفر غیرمبتلا) طی سال 1400 انجام شد. استرپتوکوک دیس گالاکتیه توسط آزمون‌های مختلف، تعیین هویت و جداسازی گردید. ژن spea توسط روش کلونینگ ta با استفاده از وکتور ptg19 در درون میزبان اشریشیاکلی xl1 blue کلون گردید. بیان ژن کلون شده در کلونی‌های نوترکیب توسط روش sdspage بررسی شد.یافته‌ها: بررسی کلونی‌های نوترکیب وجود ژن spea را به اثبات رساند. بیان ژن spea در اشریشیاکلی x11 blue توسط روش sdspage به اثبات رسید.نتیجه‌گیری: سوپرآنتی‌ژن spea باکتری استرپتوکوک دیس گالاکتیه می‌تواند توسط روش ta کلونینگ با استفاده از وکتور ptg19 در درون میزبان اشریشیاکلیxl1 blue به خوبی بیان و تخلیص شده و به عنوان کاندید واکسن بیماری پسوریازیس مورد کارآزمایی‌های مناسب قرار گیرد. روش‌های مبتنی بر میکروب و تولید باکتری‌های نوترکیب روش‌هایی مقرون به صرفه برای تولید پروتئین‌ها با رویکرد اهداف درمانی و واکسیناسیون هستند.

isolation, cloning, and expression of streptococcus dysgalactiae subspecies superantigen by sds-page in psoriasis patients

background and objective: streptococci are grampositive and anaerobic bacteria that are isolated from different sources. these bacteria are capable of producing superantigens, toxins, and biologicallyactive substances and are therefore very important in the field of infectious disease. streptococcal pyrogenic exotoxins a (spea) is produced by various bacteria, including streptococcus dysgalactiae. this study aimed at the isolation, cloning, and production of spea from streptococci from the skin of psoriasis patients.methods: in this descriptivelaboratory study, samples were taken from 60 psoriasis patients. s. dysgalactiae isolated were identified by different tests. the spea gene was cloned by the ta cloning method using ptg19 vector into the escherichia coli x11 blue as host. expression of the cloned gene in recombinant colonies was evaluated by sdspage.results: screening of white recombinant colonies confirmed the presence of spea genes. expression of the spea gene in e. coli x11 blue was confirmed by sdspage.conclusion: streptococcus superantigens can be considered as a rich source of vaccine production for different infections caused by these bacteria. by utilizing different cloning hosts and investigating optimal production conditions, s. dysgalactiae could be a candidate for future studies on vaccine production.