تشدید بیان ژن‌های شبه‌تایونین در گیاه آرابیدوپسیس و مقاومت به نماتد heterodera schachtii

تایونین‌ها و شبه‌تایونین، پپتیدهای گیاهی با وزن‌ملکولی کوچک و غنی از سیستئین با فعالیت ضدمیکروبی که نقش مهمی در مقاومت گیاهان در برابر عوامل بیماری‌زا دارند و از چندین گونه گیاهی جدا شده‌اند. هدف از این مطالعه تشدید بیان ژن‌های شبه‌تایونین (at1g12665 ​​و at1g20618) برای ایجاد مقاومت در برابر نماتد h. schachtii است. ژن‌های at1g12665 ​​(thil12) و at1g20618 (thil20) از گیاه آرابیدوپسیس جداسازی شده و گیاهان تراریخته از طریق باکتری اگروباکتریوم با استفاده از پلاسمید pmaa-red و با استفاده از روش آغشته سازی گل آذین تولید شدند. بیان ژنهای شبه تایونین در گیاهان تشدید بیان شده با روش rt-pcr تایید و میزان تشدید بیان در بذرهای قرمزرنگ و هموزیگوت با روش rt-pcr کمی مقایسه گردید. به منظور بررسی مقاومت، ریشه گیاهان 12 روزه آرابیدوپسیس تحت شرایط استریل با 60-50 لارو نماتد به ازای هر بوته در محیط knop تلقیح شدند. پانزده روز پس از تلقیح، هنگامی که لارو نر و ماده را می‌توان به‌وضوح تشخیص داد، تعداد لاروها شمارش شدند و نتایج با رقم وحشی (col-0) مقایسه شد. نتایج نشان داد که مقاومت به h. schachtii در لاین‌های تشدید بیان شده در مقایسه با نوع وحشی افزایش یافته است. به هر حال تفاوت معنی‌داری در اندازه نماتد ماده و سلول های syncytia بین لاین‌ها به جز یک لاین مربوط به ژن at1g20618 مشاهده نشد.

overexpression of thionin- like genes in and resistance to

thionins and thionin-like peptides are small cysteine-reach antimicrobial plant peptides that play an important role in resistance to plant pathogens and have been isolated from several plant species. the overexpression of thionins-like genes (at1g12665 and at1g20618) for resistance to h. schachtii was the purpose of this study in arabidopsis plants. at1g12665 (thil12) and at1g20618 (thil20) genes were isolated from arabidopsis thaliana and transgenic plants were generated through agrobacterium-mediated using the pmaa-red vector and using the floral dip method. expression of the thionin-like genes in overexpressed lines was confirmed by rt-pcr. in order to evaluate the resistance of the plants to h. schachtii, arabidopsis roots of 12-day old seedlings were inoculated with about 50-60 juveniles of nematode per plant on knop medium under sterile condition. fifteen days after inoculation, when male and female larvae could be clearly distinguished, the number of larvae was counted and results were compared with the wild-type cultivar (col-0). results showed that the resistance to h. schachtii was increased in the overexpressed lines compared with the wild type. however, there was no significant difference in the size of female nematode and syncytia cells between the lines, except for one line related to at1g20618 gene.