جداسازی باکتری‌های تجزیه‌کننده لیپید از پساب‌های صنعتی و شناسایی مولکولی آنها

زمینه و هدف: لیپازهای میکروبی، گروه مهمی از آنزیم های باارزش بیوتکنولوژی محسوب می شوند. در تحقیق حاضر تلاش شد تا سویه‌های میکروبی تولیدکننده لیپاز ازنمونه‌های پساب‌های صنعتی جداسازی و شناسایی شوند.مواد و روش ها: پس ازنمونه‌برداری از فاضلاب و پساب محل‌های مختلف، 16 کلونی از این نمونه‌ها جداسازی شد. جدایه‌ها برای بررسی توانایی تولید آنزیم لیپاز، همراه با یک سویه اکتینومیست به‌عنوان کنترل مثبت، در محیط کشت اختصاصی حاوی تویین80، کشت داده شدند. فعالیت آنزیمی براساس نمودار استاندارد لیپاز، بررسی شد. به‌منظور تشخیص مولکولی جدایه‌ها ریبوتایپینگ انجام شد. بدین منظور، dna جدایه‌ها با کمک کیت، استخراج شدند و با الکتروفورز و دستگاه نانودراپ ارزیابی گردید. سپس pcr با کمک پرایمرهای ژن 16srrna صورت گرفته و محصول pcr تعیین توالی شده و با استفاده از بلاست توالی‌ها در پایگاه داده ncbi، سویه‌ها شناسایی شدند.یافته ها: از مجموع 6 جدایه، ده سویه (62/5 درصد) قادر به تولید آنزیم لیپاز و در نتیجه ایجاد هاله شفاف در محیط کشت حاوی لیپید بودند. از این میان، دو جدایه با میزان تشکیل هاله و منبع جداسازی مشابه که بیشترین رشد و فعالیت را در 144 ساعت پس از کشت نشان داده بودند، انتخاب شدند. مقادیر فعالیت آنزیمی برای باکتری جداشده از پساب کشتارگاه و پساب مکانیکی به‌ترتیب در بازه بین 2/99 تا 22/65 و 3/73 تا39/2 واحد بر میلی‌لیتر بود.نتیجه‌گیری: باکتری‌های آئروموناس ورونی و کوپریاویدوس متالیدورانس به دلیل فعالیت لیپازی بسیار بالا نسبت به سویه های معرفی‌شده در سایر تحقیقات، به‌عنوان سویه‌های بسیارمناسب و کارآمد جهت تصفیه زیستی پساب‌ها پیشنهاد می گردد.

isolation and molecular identification of lipid-degrading bacteria from industrial wastewater

background: microbial lipases are an important group of enzymes with biotechnology value. in the present research, an attempt was made to isolate and identify lipase-producing microbial strains from industrial wastewater samples.materials and methods: after taking samples from sewage and sewage from different places,16 colonies were isolated from these samples. the isolates were cultured in a specific culture medium containing tween80 to check the ability to produce lipase enzyme. enzyme activity was determined using the light absorption curve. in order to identify the isolates molecularly, ribotyping was performed. for this purpose, the dna of the isolates was extracted and pcr was performed with the help of 16srrna gene primers. the pcr product was sequenced and the strains were identified using sequence blast in the ncbi database.results: out of a total of 16 isolates, ten strains (62.5%) were able to produce lipase enzyme as a result of creating a transparent halo in the culture medium of the lipid test. among these, two isolates with the same halo formation rate and source of isolation, which had the highest growth and activity after 144 hours were selected from the culture. enzyme activity values for bacteria isolated from slaughterhouse effluent and garage effluent ranged from 2.99 to 22.65 and 3.73to 39.2 units/ml, respectively.conclusion: due to their very high lipase activity compared to the strains introduced in other researches, aeromonas veroni and copriavidus metallidurans bacteria are suggested as very suitable and efficient strains for the biological treatment of wastewater.