بهینه‌سازی شرایط رشد هیبریدهای مولد آنتی‌بادی مونوکلنال علیه آنتی‌ژن لیشمانیا اینفنتوم

زمینه و هدف: لیشمانیا اینفانتوم، عامل اتیولوژیک لیشمانیوز احشایی در ایران است. واکسن‌های موثر و روش‌های تشخیصی برای کنترل لیشمانیوز لازم است. آنتی‌بادی‌های مونوکلونال ابزاری باارزش برای تشخیص، درمان و تعیین ویژگی آنتی‌ژنی انگل‌ها مورد استفاده قرار گرفته‌اند. هدف از این مطالعه، بهینه‌سازی شرایط رشد هیبریدهای مولد آنتی‌بادی مونوکلنال علیه آنتی‌ژن پروماستیگوت  لیشمانیا اینفنتوم است.مواد و روش‌ها: موش‌ها توسط آنتی‌ژن لیشمانیا اینفنتوم واکسینه شدند و تیتر آنتی‌بادی‌های آنان توسط روش الایزا تعیین شدند. سلول‌های طحال موش‌هایی که به‌خوبی توسط آنتی‌ژن لیشمانیا اینفنتوم ایمن شده بودند با سلول‌های sp2/0 در حضور پلی‌اتیلن گلیکول ادغام شدند. تاثیر سوپرناتانت سلول‌های sp2/0 و سلول‌های ماکروفاژ صفاقی موش‌ها بر تکثیر سلول‌های هیبریدوما بررسی شدند.یافته‌ها: در میان 12 فیوژن درمجموع 26 مونوکلون مثبت بودند که 12 مونوکلون جذب نوری (od) قابل‌قبولی داشتند. 4 کلون به‌عنوان d2 fvi6  8، 8d2 fvi3 ،   6g2 fv4 و 6g2 fv3  تعیین شدند. از این هیبریدها، مونوکلونال آنتی‌بادی‌ها علیه لیشمانیا اینفانتوم به‌دست آمد. همچنین این مطالعه نشان داد که مایع رویی (سلول‌هایsp2/0 و سلول‌های ماکروفاژ صفاقی) نقش کلیدی در تکثیر هیبریدوما و تولید آنتی‌بادی‌های مونوکلونال دارد که سرشار از فاکتورهای رشد است.نتیجه‌گیری: به نظر می‌رسد در آینده نزدیک مایع رویی مذکور می‌تواند به‌عنوان یک فاکتور رشد برای سلول‌های سرطانی و غیرسرطانی در مراکز تحقیقاتی در سطح وسیع‌تری مورد استفاده قرار گیرد.

Monoclonal Antibody Against Antigens of Leishmania infantum: Optimize the Growth Condition of Monoclonal Antibodyproducing Hybrids

Introduction: Leishmania (L.) infantum is the etiologic cause of visceral leishmaniasis in Iran. Efficient vaccines and diagnosis methods are required to control leishmaniasis. The aim of this study is produce and optimize monoclonal antibodies against promastigotes forms of L. infantum antigen.Materials and Methods: The mice were vaccinated with the L. infantum antigen and their antibody titers were determined by the ELISA method. Spleen cells of the most immune mouse were fused with SP2/0 in the presence of Poly Ethylene Glycol.The effect of supernatant of SP2/0 and mice peritoneum macrophage cells culture (SSMCC) on hybridoma cell proliferation was studied.Results: Among the 12 fusion, a total of 26 monoclonal were positive.12 of which had acceptable optical absorbance in OD 450 nm. Finally, 4 clones, designated as 8D2 FVI6, 8D2 FVI3, 6G2 FV4 and 6G2 FV3. From these hybrids, antipromastigotes L. infantum monoclonal antibodies were obtained. SSMCC was shown to play a key role in hybridoma proliferation and of mAb production. It seemed that SSMCC is rich of growth factors.Conclusion: It seems in the near future, this SCCSM can be used as a growth factor for cancerous and noncancerous cells in research centers at a wider level.