عصاره رزماری، مکمل سرم و القاء کننده تکثیر سلول های بنیادی چربی انسانی در شرایط کشت آزمایشگاهی

زمینه و هدفعصاره برگ رزماری یک گیاه دارویی ، که تکثیر سلول های بنیادی را تحریک می کند. لذا این مطالعه با هدف تعیین اثر عصاره رزماری بر تکثیرو بقاء سلول های بنیادی چربی انسانی (hascs) صورت گرفت .مواد و روش هادر این مطالعه تجربی، بافت چربی از خانم های سزارینی بیمارستان دامغان، جدا شد. سلول های استخراج شده در محیط کشت -memα alpha-dulbecco’s modified minimal essential medium حاوی 10% سرم جنین گاوی کشت داده شدند. بنیادی بودن سلول ها، با روش فلوسایتومتری و بیان مارکرهای cd90, cd73, cd105, cd44, cd34, cd45 در تعداد 106 سلول و پتانسیل تمایزی آنها تایید شد. میزان بقاء و تکثیر سلول های تیمار شده با غلظت های µg/ml 30، 40، 50، 60 و 70 میکرو گرم بر میلی لیتر عصاره رزماری حاوی 40 درصد کارنوسیک اسید به مدت 24 و 48 ساعت با استفاده از تکنیک های هموسایتومتری ، mtt و pcr ارزیابی شد.mtt: [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2h-tetrazolium bromide] pcr: polymerase chain reactionداده ها با آنالیز واریانس یکطرفه(anova)و آزمونtukey بررسی شد و سطح معنی داری 0.05 p≤ در نظر گرفته شد.یافته ها : سلول های hascs کشت داده شده، در بررسی میکروسکوپی ظاهری دوکی شکل و فیبروبلاستی از خود نشان دادند و پاسخ مثبت به مارکرهای cd44، cd73، cd90، cd105 و پاسخ منفی به مارکرهای cd34 و cd45 دادند. همچنین قابلیت تمایز به سلول های چربی و استخوانی در آنها اثبات شد. سرعت تکثیر و میزان بقاء سلول های تیمار شده با رزماری در غلظت µg/m50 و به مدت 48 ساعت افزایش معنی داری 0.05 p≤را در مقایسه با سلول هایی که در محیط فاقد رزماری وحاوی سرم کشت داده شده بودند، نشان داد.نتیجه گیریعصاره رزماری بهعنوان مکمل سرم میتواند بهمنظور آماده کردن سلولهای مناسبتری برای پیوندکاربرد داشته باشد

Rosemary Extract, a serum supplement and inducer of human adipose stem cells proliferation in vitro

Background: Rosemary leaf extract, as a medicinal plant, can stimulate stem cells proliferation. The aim of this study was to determine the effect of rosemary extract on the proliferation and survival of human adipose stem cells (hASCs). Materials and Methods: In this experimental study, fat tissue was isolated from Caesarean women at Damgan Hospital. Extracted cells were cultured in α–MEM (AlphaDulbecco’s modified minimal essential medium) containing 10% FBS. Stemness of cells was confirmed by flow cytometry and expression of CD44, CD105, CD73, CD90, CD34, CD45 markers of 106 cells and their differentiation potential. The survival rate, proliferation of cells treated with 30, 40, 50, 60 and 70 µg/ml concentrations of Rosemary extract containing 40% of carnosic acid for 24 and 48h were evaluated using hoemocytometry, MTT and PCR assays.MTT: [3(4,5dimethylthiazol2yl)2,5diphenyl2Htetrazolium bromide] PCR: Polymerase chain reaction.The data were analyzed using Spss software (version 16), with Tukey test and the level of significance was considered 0.05.Results: Cultured hASCs showed spindle and fibroblastic shapes under microscopic study. They expressed positive response to CD44, CD73, CD90, CD105 and negative response to CD34 and CD45markers and differentiated into adipocytes and osteocytes. The proliferation rate and survival of cells treated with Rosemary at a concentration of 50 μg/ml for 48 h were increased significantly (P≤0.05), as compared to cultured cells in medium without Rosemary, containing serum.Conclusion: Rosemary extract as a supplement to the serum can increase the rate of proliferation and survival of hASCs, making the cells more suitable for transplantation.