تاثیر محیط رویی سلول بنیادی مزانشیمی بر بیان ژنهای تولید کالژن سلول فیبروبالست موش

زمینه و هدف سنتز کلاژن توسط سلولهای فیبروبلاست به طور مستقیم در ترمیم بهینه‌ زخم نقش دارد؛ چرا که ایجاد این ماتریکس خارج سلولی به عنوان بستر مناسبی جهت جایگیری دیگر سلول ها بسیار اهمیت دارد؛ بنابراین هرگونه عاملی که بیان ژن کلاژن را تشدید کند، در مبحث ترمیم مورد توجه خواهد بود. در این پژوهش، اثر محیط رویی سلول بنیادی مزانشیمی بر بیان ژن های تولید کلاژن سلول فیبروبلاست موش بررسی شد.مواد و روشها از کشت سلول های مزانشیمی انسان جهت تهیه‌ فاکتورهای موثر استفاده شد. در این پژوهش، آزمایشها بر روی سلولهای فیبروبلاستی موش انجام گرفت و درنهایت با بررسی رشد سلولها و واکاوی مولکولیبیان ژنهای موثر، تاثیرات تایید شد. یافته ها ابتدا مقدار پروتئین تام محلول رویی توسط روش برد فورد اندازه گیری شد. براساس منحنی استاندارد حاصل از پروتئین معین آلبومین سرم گاوی (bsa) این مقدار 40 میکروگرم بر میلی لیتر برآورد شد. در تست سمیت با روش mtt سمیت od در غلظتهای بالا منجر به سمیت نبود؛ اما در غلطتهای رقیقتر افزایش رشد بیشتری را نشان داد. این مقدار در غلظت 10و 20میکروگرم بر میلی لیتر نسبت به گروه کنترل کاملا معنادار بود. نتیجه گیری بررسی نتایج تاثیر مایع رویی سلولهای بنیادی انسانی تاییدکننده‌ اثربخشی ترمیمی این مایع بوده و برطبق نتایج آزمایشهای پژوهش حاضر، این مایع رویی هم رشد سلولهای فیبروبلاست را تحریک میکند و هم میتواند به طور اثربخشی بیان ژنهای تولیدکننده‌ کلاژن را به مقدار زیادی افزایش دهد. از این خاصیت میتوان با رعایت نکات کلینیکی در درمان زخمها بهره برد؛ به خصوص زخمهای گستردهتری که نیازمند مدیریت بالینی بیشتر هستند

The Effect of the Mesenchymal Stem Cell Conditioned Media on Mouse Fibroblast Collagen Gene Expression

Abstract:Aims: Collagen synthesis can help to heal wounds, especially Large wounds. Any treatments that can stimulate collagen synthesis in fibroblasts can accelerate wound repair, so it has clinical value. Stem cells secrete some macromolecules and signals that can have different effects in other cells.Materials and Methods: In this study, human mesenchymal stem cells were cultured and their medium supernatant was harvested as a medium containing the signal. After determining concentration, they were exposed to mouse fibroblasts. The cell viability was examined and then in the molecular section, by designing specific primers, three The collagen gene was evaluated by RealTime PCR.Results: The results indicated a growthpromoting effect using the amount of 20 μg /ml of stem cells conditioned media in the culture medium of fibroblast cells. It was also found in the molecular section, that this concentration could increase the expression of all three selected collagen genes.Discussion and conclusion: The results of this study fully confirmed the initial goals, indicating the high power of mesenchymal stem cells in the induction of collagen synthesis, and thus could be a very good candidate for clinical studies.