بررسی ارتباط پلی‌مورفیسم‌های rs1131445 و rs4072111 ژن مسیر التهابی اینترلوکین 16 با بیماری آلزایمر دیررس در ایران

اهداف: بیماری آلزایمر شایع ترین نوع زوال عقلی در سنین پیری است که بروز آن با افزایش سن بیشتر می شود. تحقیقات نشان داده است که سیتوکین ها پروتیین هایی هستند که در مسیر های التهابی نقش ایفا می کنند و میزان آن ها در بیماری های التهابی تغییر می کند. بر مبنای این واقعیت که بیماری آلزایمر یک بیماری التهابی است، می توان نتیجه گرفت که سیتوکین ها قادرند بر بروز این بیماری تاثیرگذار باشند. il16، سیتوکینی است که نقش آن در پاره ای از بیماری های التهابی به اثبات رسیده است. این ژن یکی از ژن های کد کننده سیتوکین های مسیر التهابی است که می تواند در پاتولوژی التهابی مشاهده شده در اطراف پلاک های پیری ایجادشده در بیماری آلزایمر ایفای نقش کند و با پاتولوژی بیماری آلزایمر مرتبط باشد. براین اساس، هدف این مطالعه بررسی اثر دو پلی مورفیسم rs1131445 وrs4072111 از ژن il16 بر خطر ابتلا به بیماری آلزایمر دیررس در جمعیت ایرانی بود.مواد و روش ها: در این مطالعه 144 فرد مبتلا به بیماری آلزایمر که علایم ابتلا به آلزایمر آنها توسط روان پزشک و براساس معیارهای مصاحبه بالینی تایید شده بود، به عنوان گروه بیمار و 173 فرد سالم به شرط نداشتن بیماری روانی به عنوان گروه کنترل انتخاب شدند. dna افراد به روش سالتینگ اوت استخراج شد و واکنش pcr برای تکثیر قطعه موردنظر با استفاده از پرایمرهای طراحی شده در شرایط اپتیمایزشده برای هر پلی مورفیسم انجام گرفت. محصول pcr در ابتدا برای تایید عملکرد صحیح pcr با استفاده از روش الکتروفورز ژل پلی اکریلامید (page) کنترل شد. سپس محصول pcr با روش rflp به کمک آنزیم محدودکننده موردنظر، بُرش داده شد و به کمک الکتروفورز ژل پلی اکریلامید، ژنوتیپ نمونه ها تعیین و ژنوتیپ افراد براساس روش pcrrflp مشخص شد. برای تجزیه وتحلیل آماری داده های به دست آمده از نسخه 2/3/1 نرم افزار openepi و نسخه 11/5 نرم افزار spss استفاده شد.یافته ها: بررسی تحلیل آللی بین دو گروه جمعیت بیمار و سالم ضمن درنظرگرفتن فاصله اطمینان (%95=ci) و سطح معناداری 0/05 برای پلی مورفیسم rs1131445 نشان می دهد که رابطه آلل c با بیماری آلزایمر معنادار نبوده (0/656=p) و ژنوتیپ tc در مقایسه با ژنوتیپ tt، اختلاف معنادار آماری نشان نداده است (0/614=p). بااین حال بررسی تحلیل آللی برای پلی مورفیسم rs4072111، بین دو گروه جمعیت بیمار و سالم نشان می دهد که رابطه آلل t با بیماری معنادار است و این آلل در ایجاد بیماری نقش محافظتی دارد (0/008=p). علاو براین ژنوتیپ tc به عنوان یک حالت محافظتی، رابطه معناداری را با بیماری نشان داد (0/007=p).نتیجه گیری: وجود پلی مورفیسم در برخی از ژن های مسیر التهابی، افراد را مستعد ابتلا به آلزایمر می کند. تغییرات ژنتیکی در توالی dna از ژن il16 منجر به تغییر محصول سیتوکین یا تغییر فعالیت آنها می شود. معناداری ارتباط پلی مورفیسم rs4072111 و بیماری آلزایمر با پیش فرض این مطالعه مطابق بوده است و نقش احتمالی این پلی مورفیسم را در بیماری آلزایمر دیررس نشان می دهد. با وجود این، نبود ارتباط میان پلی مورفیسم rs1131445 و بیماری آلزایمر دیررس با توجه به کوچک بودن حجم نمونه قابل اثبات نیست و برای اثبات آن به حجم نمونه بزرگ تری نیاز است.

Association Between Interleukin 16 Gene Polymorphisms (rs1131445, rs4072111) and Late Onset of Alzheimer’s Disease in Iranian Patients

Objectives: Alzheimer rsquo;s disease is the most common kind of dementia in the old age, and its incidence increases with age. Previous studies have shown that cytokines are proteins that play an important role in inflammation, and their level changes in inflammatory diseases. Since Alzheimer rsquo;s disease is an inflammatory disease, cytokines may influence the occurrence of this disease. IL16 is a cytokine whose role has been proved in many inflammatory diseases. This gene is one of the coding genes of cytokines of the inflammatory process. It may be responsible for inflammatory pathology seen around old age plaques in Alzheimer rsquo;s disease. It can also associate with the pathology of Alzheimer rsquo;s disease. Therefore, the aim of this study was to investigate the effects of 2 polymorphisms of gene IL16 (rs1131445 and rs4072111) on the risk of patients diagnosed with Alzheimer rsquo;s disease in the Iranian population.Methods Materials: In this study, the intervention group consisted of 144 individuals who were diagnosed with Alzheimer rsquo;s disease by psychologists based on a clinical test (DSMIV), and the control group included 173 healthy individuals with no psychological disorders. DNA was extracted by salting out technique. The PCR response was conducted (for replicating the mentioned pieces) for any polymorphism in optimized conditions by using designed primers. The product of PCR was first checked for the confirmation of accurate function of PCR using polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE). Next, the PCR product was dissected by restriction fragment length polymorphism (RFLP) method with intended confining enzyme, and then the genotype of the samples was determined by PAGE. Individual genotypes were determined using the PCRRFLP method. Statistical analyses were done using OpenEpi 2.3.1 and SPSS 11.5.Results: The study of allelic analysis between the control and intervention groups by considering the confidence interval (CI=90%) and significant level (0.05) for rs1131445 showed that the C allele had no significant association with Alzheimer rsquo;s disease (P=0.656). The TC genotype did not show any significant difference with TT genotype (P=0.614). However, the study of allelic analysis for rs4072111 polymorphism between 2 groups showed that the relationship of T allele with the disease is significant, and this allele has a protective role in creating the disease (P=0.008). In addition, TC genotype as a protective status showed a significant association with Alzheimer rsquo;s disease (P=0.007).Conclusion: The existence of polymorphism in some genes of the inflammatory pathway could make people susceptible to Alzheimer rsquo;s disease. The genetic changes in DNA sequence of gene IL16 could result in changes in cytokine product or its function. The association between rs4072111 and Alzheimer rsquo;s disease supports the presumptions and shows a probable role of this polymorphism in Alzheimer disease. Besides, the association between rs1131445 and Alzheimer disease cannot be proven due to the small number of samples (Power: 8.23%).