تولید آنزیم ضد لوسمی ال-آسپاراژیناز توسط سویه ای از استافیلوکوکوس جداسازی شده از خاک کشاورزی

سابقه و هدف: آنزیم ال آسپاراژیناز به عنوان یکی از بهترین داروهای ضد سرطان خون شناخته می شود. با توجه به این که آسپاراژینازهای داروئی از منابع باکتریایی می باشند، هدف از این تحقیق یافتن باکتری های تولید کننده الآسپاراژیناز بومی بود.مواد و روش ها: جداسازی باکتری مولد آنزیم از خاک های کشاورزی جنوب تهران انجام شد. غربالگری اولیه بر روی نوترینت آگار و سپس روی محیط m9 آگار صورت گرفت. باکتری منتخب که بیش ترین فعالیت آنزیمی را داشت، توسط روش های بیوشیمیایی و فیلوژنی شناسایی شد. اندازه گیری فعالیت آنزیمی به روش نسلریزاسیون انجام شد. برای بهینه سازی تولید آنزیم فاکتورهایی چون منبع کربن، نیتروژن، میزان نمک، تاثیر ph محیط، دما و هوادهی مورد بررسی قرار گرفت.یافته ها: باکتری انتخاب شده یک سویه از استافیلوکوکوس بود که استافیلوکوکوس سویه mgm1 نامیده شد. شرایط بهینه فعالیت آنزیمی بدین صورت به دست آمد که گلوکز 1 درصد به عنوان منبع کربن، عصاره گوشت g/l 5/0 به عنوان منبع نیتروژن در غلظت صفر نمک با ph بهینه 7 تا 8 در غلظت نمک صفر با هوادهی rpm120 و دمای 35 درجه سانتی گراد بود.استنتاج: با توجه به این که شرایط بهینه فعالیت آنزیمی باکتری mgm1 مشابه با شرایط فیزیولوژیک بدن بوده، مطالعات بیش تر روی آنزیم تولید به دست آمده به منظور دستیابی به یک آسپاراژیناز موثر دارای اهمیت می باشد

Production of anti-leukemia L-Asparaginase by a strain of Staphylococcus Isolated from Agricultural Soil

Background and purpose: Lasparaginase is a wellknown enzyme that is used as one of the most effective antileukemic drugs. Considering that the asparaginases used as antitumor are bacterialbased enzymes, the aim of this study was to find indigenous potential bacteria producing asparaginase.Materials and methods: The enzyme producing bacteria was isolated from the agricultural soils around Gharchak, Tehran province, Iran. Screenings were performed on nutrient agar and M9 agar, respectively. The most efficient bacterium having asparaginase activity was selected and identified by biochemical and phylogenetic methods. Asparaginase activity was assayed by Nesslerization method. Optimization of the enzyme production was conducted by assessment of some factors such as the effect of carbon and nitrogen sources, salt concentration, pH, temperature and agitation.Results: The selected bacterium was identified as a strain of staphylococcus that was named MGM1.The optimal conditions for enzyme activity was obtained at following conditions: 1% glucose as carbon source and 0.5 g/l beef extract as nitrogen source, without salt (NaCl) at pH range of 78 with shaking 120 rpm at 35 ◦C.Conclusion: The optimal activity for the enzyme produced by MGM1 was similar to physiological conditions of human body, therefore, further studies on this enzyme would be of great value in finding a new efficient asparginase enzyme.