اثر ال-کارنیتین بر صلاحیت تکوینی جنین ‌های حاصل از تخمک‌ های موش سوری انتخاب شده با رنگ آمیزی brilliant cresyl blue بعد از پارتنوژنز

سابقه و هدف: جنین های آزمایشگاهی حاصل از تکنیک های کمک باروری (art) مانند پارتنوژنز صلاحیت تکوینی پایین تری نسبت به جنین های تولید شده در محیط in vivo دارند. مطالعه حاضر به منظور بررسی اثر تیمار با الکارنیتین طی ivm بر بلوغ تخمک های نابالغ انتخاب شده توسط رنگ آمیزی brilliant cresyl blue (bcb) و شایستگی تکوینی بعدی آن ها بعد از پارتنوژنز طراحی شد.مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی، تخمک های نارس از تخمدان موش های سوری نژاد nmri جمع آوری و با رنگ bcb به مدت 90 دقیقه رنگ آمیزی شدند. سپس تخمک های نارس bcb+ (با سیتوپلاسم آبی رنگ) به محیط کشت بافت 199tcm حاوی غلظت های مختلف الکارنیتین (mg/ml 6/0، 3/0 ، 0) منتقل و در انکوباتور ˚c 37 و co2 5 درصد قرار داده شدند. پس از 24 ساعت، میزان بلوغ هسته ای (با استفاده از رنگ آمیزی هوخست) و بلوغ سیتوپلاسمی (با استفاده از اندازه گیری میزان گلوتاتیون از طریق رنگ آمیزی مونوکلروبیامین) در تخمک های متافاز ii بررسی گردید. هم چنین میزان کلیواژ، میزان تکوین بلاستوسیست (bdr) و تعداد کل سلول های بلاستوسیست بعد از پارتنوژنز محاسبه شد.یافته ها: تیمار با هر دو غلظت الکارنیتین باعث افزایش میزان گلوتاتیون (01/0> p)، بلوغ تخمک ها (01/0> p) و bdr (05/0>p) در مقایسه با گروه کنترل شد. با این وجود تیمار با الکارنیتین بر میزان کلیواژ و تعداد کل سلول های بلاستوسیست تاثیر آماری معنی داری نداشت.استنتاج: یافته های مطالعه حاضر نشان داد که تیمار تخمک های نابالغ bcb+ موش سوری با الکارنیتین طی ivm، احتمالاً با بهبود بلوغ هسته ای و سیتوپلاسمی تخمک ها باعث افزایش صلاحیت تکوینی جنین های حاصل از پارتنوژنز می شود.

Effect of L- carnitine on Developmental Competence of Mouse Oocytes Selected by Brilliant Cresyl Blue Staining after Parthenogenesis

Background and purpose: Embryos produced from in vitro assisted reproductive technologies (ART) manipulations, such as parthenogenesis, are less developmentally competent than in vivoderived embryos. This study was designed to evaluate the effect of Lcarnitine treatment during IVM on maturation of immature oocytes selected by Brilliant Cresyl Blue (BCB) staining, and their subsequent developmental competence after parthenogenesis. Materials and methods: Immature oocytes collected from NMRI mice ovaries were stained with BCB for 90 min. BCB+ oocytes (with blue color cytoplasm) were then cultured in tissue culture medium (TCM) 199 with 0.0, 0.3 and 0.6 mg/ml Lcarnitine at 37 deg;C and 5% CO2 under maximum humidity. After 24 hours, nuclear maturation (using Hoechst staining) and cytoplasmic maturation (by measuring the intracellular glutathione (GSH) concentration with monochlorobimane) were recorded in metaphase II oocytes. Cleavage rate, blastocyst development rates (BDR) and total cell number of blastocyst were also determined after parthenogenesis. Results: Both Lcarnitine concentrations significantly increased GSH (P<0.01), nuclear maturation (P<0.01) and BDR (P<0.05) compared with those in the control group. Lcarnitine had no significant effect on cleavage rate and total blastocyst cell numbers. Conclusion: These results demonstrated that Lcarnitine supplementation during IVM of immature BCB+ oocytes could increase developmental competence of oocytes after parthenogenesis, possibly by improvement of nuclear and cytoplasmic maturation of oocytes.