القاء بیان مداوم سیکلواکسیژناز-2 در رده سلولی سرطان سینه از طریق ترانسفکشن آن ها با پلاسمید psg5-cox-2

سابقه و هدف: یکی از مشکلات عمده مربوط به شیمی درمانی، بروز مقاومت در برابر داروهای ضد سرطان است. گزارش های اخیر، وجود ارتباط میان بروز سیکلواکسیژناز- (cox-2) (cyclooxygenase-2) و توسعه فنوتیپ مقاومت چند دارویی (mdr) (multidrug resistance) را نشان داده اند. cox2 به طور مداوم در سلول ها بیان نمی شود، بلکه بیان آن توسط سیگنال های التهابی، فاکتورهای رشد و سیتوکین ها در محل التهاب القاء می شود. جهت بررسی ارتباط میان بیان cox-2 و ترانسپورترهای mdr در شرایط in vitro به سلول هایی نیاز است که این پروتئین را به صورت مداوم بیان کنند. این مطالعه با هدف القاء بیان مداوم cox-2 در رده سلولی سرطان پستان انسان mcf7 و mcf7/mx انجام گرفت.مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی، پلاسمید حاوی توالی cox-2 در سلول های باکتری اشرشیا کولی کلون شد، سپس پلاسمید خالص سازی شده توسط فرآیند لیپوفکشن با کمک معرف فیوژن 6 به رده سلولی mcf7 و mcf7/mx انتقال یافت. در آخر محتوی پروتئینی به دست آمده از سلول های ترانسفکت شده طی فرآیند وسترن بلات جداسازی و بیان پروتئین cox-2 در آن ها مورد بررسی قرار گرفت.یافته ها: نتایج نشان داد که سلول های mcf7 ترانسفکت شده ای که نسبت حجم فیوژن 6 به dna در آن ها 3:1 است و محیط حاوی جنتیسین 24 ساعت بعد از پاساژ به آن ها افزوده شده است، بیش ترین میزان بیان پروتئین cox-2 را داشت. هم چنین در سلول های mcf7/mx نیز بیان cox-2 در سلول های ترانسفکت شده ای که نسبت حجم فیوژن 6 به dna در آن ها 3:2 بود، نسبت به کنترل افزایش یافت (p<0.05).استنتاج: در حقیقت سطح بیان ژن مورد نظر بسته به رده سلولی و شرایط کشت متفاوت است و افزایش میزان dna لزوما منجر به افزایش کارایی ترانسفکشن نمی شود.