بیان پروتئین نوترکیب IpaD-STxB و بررسی ایمنی زایی آن در موش سوری

سابقه و هدف: باکتری شیگلا، شایع ترین عامل اسهال بوده و تاکنون واکسن موثری علیه آن یافت نشده است. پروتئین ipad و انتروتوکسین شیگلا یاb subunit of shiga toxin (stxb) نقش مهمی در تهاجم، بیماری‌زایی و ایجاد عفونت توسط شیگلا دارد. برای بررسی ایمنی‌زایی هر یک از پروتئین‌های ممزوج ipad و stxb می‌توان از دو مدل حیوانی موش و خوکچه هندی استفاده نمود و نقش هر یک از پروتئین‌های نوترکیب ipad-stxb را در تهیه واکسن مناسب مشخص نمود.مواد و روش‌ها: مطالعه حاضر از نوع مطالعه تجربی می باشد که در آن اطلاعات مربوط به توالی ژنی ipad وstxb از بانک ژنی استخراج و به صورت صناعی تهیه شد. این ژن به درون باکتری coli bl21 de3 e. منتقل و پروتئین مورد نظر توسط باکتری تولید شد. میزان بیان پروتئین نوترکیب مورد ارزیابی و با استفاده از تکنیک لکه‌گذاری وسترن، تایید شد. پروتئین نوترکیب با استفاده از ستون کروماتوگرافی، تخلیص و در چهار نوبت متوالی به موش سوری تزریق شد. از تزریق دوم (یادآور اول) به بعد، یک هفته پس از انجام تزریق، خون‌گیری انجام و مورد آزمایش الایزا قرار گرفت.یافته‌ها: نتایج حاکی از افزایش محسوس تیتر آنتی بادی علیه پروتئین ipad-stxb در موش بود. ایمنی‌زایی آن با استفاده از سم فعال o157:h7 e. coli مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج نشان داد که موش‌های ایمن شده توانستند 5/7 برابر ld50 شیگا توکسین e. coli o157:h7 را تحمل نمایند.استنتاج: پروتئین حاصل از ترکیب ژن‌های ipad وstxb می‌تواند موش سوری را نسبت به شیگا توکسین مصون نماید. در نتیجه، پروتئین stxb در مدل حیوانی موش سوری موجب ایمنی زایی شده و پروتئین نوترکیب تولید شده می‌تواند کاندیدای مناسبی جهت تولید واکسن نوترکیب علیه انواع شیگلا باشد.