مقایسه کمی تولید پروتیین نوترکیب انتهای کربوکسیل نوروتوکسین بوتولینوم A در کشت های ناپیوسته و ناپیوسته خوراک دهی شده باکتری اشرشیا کلی

A سابقه و هدف: پروتیین 50 کیلو دالتونی واقع در انتهای کربوکسیل زنجیره سنگین نوروتوکسین کلستریدیوم بوتولینوم تیپامروزه برای تولید واکسن نوترکیب علیه بوتولیسم به کار می رود. هدف از این پژوهش بررسی تولید این پروتیین نوترکیب (bont/a-hc)در باکتری اشرشیا کلی در کشت های با تراکم سلولی بالا (ناپیوسته خوراک دهی شده) و مقایسه تولید آن با کش تهای ناپیوسته بود.اصلاح شده با فرایند کشت m مواد و روش ها: در این مطالعه، رشد باکتری اشرشیا کلی حاوی پلاسمید نوترکیب در محیط 9و زمان isopropyl b-d-thiogalactoside ناپیوسته بررسی گردید. به منظور افزایش بیان پروتیین نوترکیب، میزان غلظت القاکنندهبهینه گردید. سپس کشت ناپیوسته خورا ک دهی شده با taguchi با حجم کاری 2 لیتر، به کمک روش آماری fermentor القا درروش خورا کدهی نمایی با حجم ثابت تا رسیدن به تراکم سلولی بالا انجام گرفت. در پایان میزان بیان پروتیین نوترکیب هدف به کمکمحاسبه شد. sds-page و دانسیتومتری ژل bradford روشیافته ها: در شرایط بهینه شده کشت ناپیوسته و ناپیوسته خوراک دهی شده، به ترتیب مقدار 62 و 486 میلی گرم پروتیین نوترکیببه ازای یک لیتر از محیط کشت حاصل گردید. bont/a-hcاستنتاج: بر اساس یافته های این تحقیق می توان نتیج ه گیری کرد که رسیدن به تراکم سلولی بالا در کشت های ناپیوستهخوراک دهی شده در افزایش بازدهی تولید پروتیین های نوترکیب بسیار موثر است.