جداسازی و توصیف باکتریوفاژ هلیکوباکترپیلوری از نمونه فاضلاب در بیمارستان سطح سه در شمال ایران

سابقه و هدف: هلیکوباکتر پیلوری یک باکتری گرم ‌منفی، میکروآئروفیل و مارپیچی ‌شکل است که به‌عنوان یکی از عوامل اصلی در بروز بیماری‌های گوارشی مانند گاستریت مزمن، زخم معده و دوازدهه و حتی سرطان معده شناخته می‌شود. شیوع بالای این عفونت در بسیاری از کشورها، به‌ویژه در کشورهای در حال توسعه، و افزایش مقاومت آنتی‌بیوتیکی این باکتری نسبت به درمان‌های رایج، موجب کاهش اثربخشی پروتکل‌های درمانی موجود شده است. در این راستا، استفاده از باکتریوفاژها به‌عنوان ویروس‌های اختصاصی علیه باکتری ها، می‌تواند رویکردی نوین، هدفمند و ایمن در درمان عفونت‌های مقاوم باشد. این مطالعه با هدف جداسازی و بررسی ویژگی‌های باکتریوفاژ موثر علیه هلیکوباکتر پیلوری طراحی و انجام پذیرفت.مواد و روش ‌ها: در یک مطالعه تجربی، نمونه فاضلاب از بیمارستان بوعلی سینا (مازندران) جمع‌آوری شد. پس از جداسازی، باکتریوفاژ با استفاده از روش spot test شناسایی و فعالیت لیتیک آن بررسی گردید. تیتر فاژ با روش(dla assay) تعیین شد. مرفولوژی فاژ با میکروسکوپ الکترونی عبوری (tem) مشاهده و طبقه‌بندی گردید. هم‌چنین پایداری فاژ در شرایط مختلف دما (4، 25، 37 و 55 درجه سانتی‌گراد) و (ph 3-9) مورد ارزیابی قرار گرفت.یافته‌ها: فاژ از خانواده پودوویریده با تیتر pfu/ml 10 جداسازی شد. ساختار فاژ شامل سر ایکوزاهدرال و دم کوتاه غیر منقبض‌ شونده بود. تست spot وجود فعالیت لیتیک را تایید کرد. فاژ در دمای 37 درجه سانتی‌ گراد و ph برابر 5 بیش ترین پایداری و فعالیت را از خود نشان داد.استنتاج: با توجه به فعالیت لیتیک موثر و پایداری مناسب در شرایط فیزیولوژیک، باکتریوفاژ جداسازی‌ شده پتانسیل بالایی برای توسعه فاژتراپی علیه عفونت‌های ناشی از هلیکوباکتر پیلوری دارد. استفاده از این رویکرد می‌تواند راهکاری نوید بخش برای مقابله با مقاومت آنتی‌بیوتیکی در آینده باشد.

isolation and characterization of a helicobacter pylori bacteriophage from a sewage sample at a tertiary hospital in northern iran

background and purpose: helicobacter pylori is a gram-negative, microaerophilic, and spiral-shaped bacterium recognized as a major causative agent of gastrointestinal diseases such as chronic gastritis, peptic ulcers, and gastric cancer. the high prevalence of this infection, particularly in developing countries, combined with the increasing antibiotic resistance of the bacterium, has significantly reduced the effectiveness of current treatment protocols. in this regard, bacteriophages, viruses that specifically target bacteria, have emerged as a promising, targeted, and safe alternative for the treatment of resistant infections. accordingly, this study was designed to isolate and characterize a lytic bacteriophage with efficacy against h. pylori.materials and methods: in this experimental study, a wastewater sample was collected from bou ali sina hospital (mazandaran province, iran). following phage isolation, the bacteriophage was identified, and its lytic activity was evaluated using the spot test method. phage titer was determined by the double-layer agar (dla) assay. the morphology of the phage was observed and classified using transmission electron microscopy (tem). in addition, phage stability was assessed under various temperature conditions (4 c, 25 c, 37°c, and 55 c) and ph ranges (3–9).results: a phage belonging to the podoviridae family was isolated, with a titer of 10⁶ pfu/ml. the phage structure included an icosahedral head and a short, non-contractile tail. the spot test confirmed strong lytic activity. the phage exhibited the highest stability and lytic activity at 37 c and ph 5.conclusion: given its effective lytic activity and favorable stability under physiological conditions, the isolated phage demonstrates significant potential for development as a phage therapy agent targeting h. pylori infections. this approach could serve as a promising strategy for combating antibiotic resistance in the future.