تاثیر پلاسمای غنی از پلاکت (prp) بر روی تمایز سلول های بنیادی مشتق از پالپ دندان به سمت سلول های انسولین ساز پانکراس

سابقه و هدف: سلول‌های بنیادی پالپ دندان (dpsc) با قابلیت تمایز به انواع مختلفی از سلول‌های فرد بالغ، چشم انداز جدیدی را در درمان انواع بیماری‌ها فراهم کرده است. با این حال بازدهی روش تمایز، برای تولید سلول‌های تولیدکننده انسولین (ipc) با چالش‌های مختلفی مواجه می‌باشد. در مطالعه حاضر، به تمایز سلول‌های بنیادی پالپ دندان به سمت سلول‌های تولید‌کننده انسولین با استفاده از پلاسمای غنی از پلاکت (prp) پرداخته شده است. مواد و روش‌ها: در این مطالعه از نوع تجربی برای تولید سلول‌های ipc، در مرحله اول سلول‌های بنیادی پالپ دندان کشت داده شده‌اند و سپس برای تایید خصوصیات سلول‌های بنیادی، مورفولوژی سلول‌های بنیادی با مشاهده میکروسکوپی، بیان شاخص‌های cd90 و cd105 با فلوسایتومتری و پتانسیل تمایزسلول بنیادی به سمت چربی مورد ارزیابی قرار گرفت. بعد از تایید خصوصیت چند توانی سلول بنیادی، پروتکل 18 روزه تمایز به سمت سلول‌های تولیدکننده انسولین شروع شد. سپس ژن های مربوط به اندوکرین پانکراسی شامل insulin، pdx1، glut2 و glucagon با استفاده از روش real_time pcr، سنجش انسولین و سی_پپتید ترشح شده با استفاده از الایزا و بررسی اثر prp بر روی حیات سلول ها با استفاده از تست زنده مانی سلولی ((mtt نیز مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته‌ها: نتایج نشان داد که با استفاده از پروتکل تمایزی نامبرده شده، در گروه تمایزی حاوی prp، سلول‌ها با مورفولوژی شبیه به خوشه‌های جزایر لانگرهانس حاصل شده‌اند. بیان ژن‌های مربوط به اندوکرین پانکراسی در گروه تمایزی دارای prp به‌صورت معناداری بالاتر از گروه‌های دیگر بوده است. هم‌چنین این سلول‌ها در دو گروه تمایزی دارای prp و فاقد prp بازدهی متفاوتی در مواجهه با غلظت‌های متفاوت گلوکز نسبت به ترشح انسولین و سی_ پپتید داشته‌اند. علاوه بر این نرخ تکثیر سلولی در گروه دارای prp، بالاتر از سایر گروه‌ها بوده است. استنتاج: استفاده از dpsc و prp بدلیل دردسترس بودن و عدم نیاز به روش‌های تهاجمی برای به‌دست آوردن این منابع و هم‌چنین ایمنی‌زایی پایین به‌دلیل استفاده از بافت‌های خود فرد به نظر می‌رسد یک روش هدفمند برای تولید سلول‌های ترشح‌کننده انسولین می‌باشد.

the effect of platelet-rich plasma (prp) on the differentiation of dental pulp-derived stem cells into pancreatic insulin-producing cells

background and purpose: dental pulp stem cells (dpscs) with the ability to differentiate into different types of adult cells have provided a new vision in the treatment of various diseases. however, different challenges remain with differentiation methods to produce insulin-producing cells (ipcs). in the present study, the differentiation of dental pulp stem cells into ipcs using platelet-rich plasma (prp) has been addressed. materials and methods: in this experimental study for generation of ipcs, dpscs were cultured in the first step, and then to confirm the characteristics of stem cells, the morphology of stem cells was confirmed by microscopic observation, and then the expression of cd90 and cd105 markers assessed by flow cytometry. after confirming the pluripotency of the stem cells, a 18days differentiation protocol into ipcs began. following that, pancreatic endocrine genes such as insulin, pdx1, glut2 and glucagon were analyzed using real-time pcr. insulin and c-peptide release was assessed using elisa. to investigate the effect of platelet-rich plasma on cell viability, the mtt test was performed. results: results showed that the use of the above-mentioned differentiation protocol, in the differentiation group containing prp, the cells resembled langerhans islet clusters. the expression of pancreatic endocrine genes in the differentiation group containing prp was significantly higher than the other groups. additionally, in two differentiation groups with and without prp, the cells responded differently to glucose concentrations compared to insulin and c-peptide release. furthermore, the rate of cell proliferation in the differentiation group containing prp was higher than the other groups. conclusion: based on the availability of dental pulp stem cells and prp, the absence of invasive methods for obtaining these resources, as well as the low immunogenicity due to the use of the patient’s tissues, seems to be appropriate method for producing insulin-secreting cells.