بررسی فعالیت لیتیک فاژ جداسازی شده از شیر علیه اشریشیاکلی مولد بتالاکتاماز وسیع الطیف

سابقه و هدف: اشریشیاکلی شایع‌ترین عامل عفونت دستگاه ادراری می‌باشد. استراتژی درمان با ظهور اشریشیاکلی مولد بتالاکتاماز وسیع‌الطیف و مقاومت آن به اکثر آنتی‌بیوتیک‌ها با مشکل مواجه شده است. باکتریوفاژها به‌عنوان گزینه درمانی جایگزین پیشنهاد می‌شوند. به همین منظور این مطالعه با هدف بررسی فعالیت لیتیک فاژ جداسازی شده از شیر پاستوریز نشده علیه اشریشیاکلی مولد بتالاکتاماز وسیع‌الطیف، انجام شد.مواد و روش‌ها: در این مطالعه تجربی جهت آماده سازی باکتری، اشریشیاکلی از 9 نمونه عفونی ادرار جداسازی شد. سپس اشریشیاکلی مولد بتالاکتاماز وسیع‌الطیف با روش دیسک دیفیوژن (kirbybauer) تایید شد. باکتریوفاژ نیز از نمونه شیر پاستوریزه نشده جداسازی شد. فعالیت لیتیک فاژ علیه اشرشیاکلی با spot test تایید شد. تیتر فاژ با تکنیک dla assay محاسبه شد. زمان نهفتگی فاژ تعیین و فنوتیپ فاژ با میکروسکوپ الکترونی مشخص شد.یافته‌ها: فعالیت لیتیک فاژ علیه اشریشیاکلی تولیدکننده بتالاکتاماز وسیع‌الطیف در شرایط in vitro با تشکیل هاله عدم رشد تایید شد. تیتر فاژ pfu/ml1010 × 15 محاسبه شد. تصاویر میکروسکوپ الکترونی کوکتل فاژ متعلق به خانواده‌های میوویریده و پودوویریده را تایید نمود. دوره نهفتگی فاژ 20 دقیقه بود.استنتاج: براساس یافته‌های این مطالعه باکتریوفاژ جداسازی شده از شیر پاستوریزه نشده علیه اشریشیاکلی مولد بتالاکتاماز وسیع الطیف در شرایط in vitro موثر است.

Lytic Activity of Isolated Phage from Milk Against Extended-Spectrum Beta-Lactamase Escherichia coli

Background and purpose: Escherichia coli (E.coli) is the most common cause of urinary tract infection. The treatment strategy has been hampered by the emergence of broadspectrum betalactamaseproducing E.coli and its resistance to most antibiotics. Bacteriophages are suggested as an alternative treatment option. This study aimed at evaluating the lytic activity of isolated phage from unpasteurized milk against ExtendedSpectrum BetaLactamase (ESBLs) E.coli.Materials and methods: In this experimental study, E. coli was isolated from nine urinary tract infection samples and was confirmed as broadspectrum betalactamaseproducing by the KirbyBauer method. Bacteriophage was isolated from unpasteurized milk samples. Lytic activity of phage was determined by the spot test. Phage titer was calculated using the DLA assay. The phage latent period was detected and phenotype of the phage was determined by electron microscopy.Results: Lytic activity of phage against E.coli was confirmed by the formation of an inhibition zone. The phage titer was 15 ×1010 PFU/ml. The images of electron microscopy confirmed the phage cocktail belonged to Myoviridae and Podoviridae families. The latent period of bacteriophage was 20 min.Conclusion: Isolated bacteriophage from unpasteurized milk is effective on broadspectrum betalactamase E. coli.