بررسی بیان mhc1 توسط سلول ماکروفاژ j774 تریت شده با پروتئین نوترکیب hiv-1 tat 49-59/hpv16, 18, 6, 11 e7 در محیط آزمایشگاهی

سابقه و هدف: پاپیلوما ویروس انسانی(hpv) از جمله عوامل عفونی است که در انسان منجر به زگیل و بدخیمی های پوستی ژنیتال و غیرژنیتالی می شود. پروتئین e7این ویروس، انکوپروتئین کوچکی است که هدف اصلی در واکسن های درمانی محسوب می شود. پروتئین e7 به همراه hiv1 پپتید tat(49-59)نقش حفاظتی ایفا نموده که منجر به پاسخ ایمنی th1 و ctls ها می شود. هدف از این مطالعه طراحی پروتئین نوترکیب hiv1 tat 49-59/hpv16, 18, 6, 11 e7 در محیط آزمایشگاهی بود تا بتوان عملکرد این آنتی ژن را در بیان mhc1 مورد بررسی قرار داد.مواد و روش‌ها: در این مطالعه جهت بررسی بیان mhc1 و همچنین عملکرد پپتید tat در عرضه پروتئین نوترکیب به سطح mhc1 از رده سلولی ماکروفاژ j774 استفاده شد. رده سلولی ماکروفاژ موشی j744 با غلظت‌های 10، 50 و 100 میکروگرم از هر یک از پروتئین‌های دارای پپتیدtat و فاقد پپتیدtat تیمار شدند. پس از 24 ساعت سلول ها جمع آوری و سپس توسط دستگاه فلوسایتومتری خوانش شد.یافته‌ها: در این بررسی سلول های j774 با پروتئین های e7tat و e7 در غلظت‌های مختلف تریت و مورد ارزیابی قرار گرفتند. این مطالعه نشان می دهد که غلظت 10 میکروگرم از پروتئین e7tat منجر به افزایش بیان mhc1 شده است، در حالی که در غلظت های بالاتر از این پروتئین، بیان مولکول mhc1 نسبت به گروه فاقد tat کاهش چشمگیری داشته است.استنتاج: بررسی این مطالعه نشان می‌دهد که پروتئین e7tat در غلظت‌های پایین‌تر می‌تواند به عنوان محرکی در جهت افزایش بیان mhc1 عمل کند و به نظر می‌رسد که می تواند در واکسن‌های تراپئوتیک مورد استفاده قرار گیرد.

Examination of MHC-1 Expression by J774 Macrophage Cells Treated with Recombinant Protein HIV-1 Tat 49-59 / HPV16, 18, 6, 11 E7 In Vitro

Background and purpose: Human papillomavirus (HPV) is one of the infectious agents that causes genital and nongenital warts and skin cancers in humans. The E7 protein of this virus is one of the small oncoproteins that may be the main target in therapeutic vaccines. E7 protein with HIV1 Tat peptide (4959), plays a protective role that cause immune Th1 and CTLs response. The aim of this study was to design a recombinant HIV1 Tat 4959 / HPV16, 18, 6, 11 E7 protein in vitro and the function of this antigen for MHC1 expression.Materials and methods: In this study, macrophage cell line J774 was used to evaluate the expression of MHC1 and the function of Tat peptide in delivery of recombinant protein to the surface of MHC1. J744 mouse macrophage cell line was treated by10, 50, and 100 mu;g of each of the proteins with and without Tat peptide. After 24 hours, the cells were collected and then analyzed by flow cytometry.Results: In this study, J774 cells were treated and analyzed by E7Tat and E7 proteins at different concentrations. The study showed that 10 mu;g of E7Tat protein increased the expression of MHC1, while at higher concentrations of this protein, the expression of MHC1 molecule decreased considerably compared to the group without Tat peptide.Conclusion: E7Tat protein at lower concentrations can act as a stimulant for increasing the MHC1 expression and could be used in therapeutic vaccines.