بررسی خصوصیات مورفولوژیکی و مولکولی(28s rdna) دیکروسلیوم دندرتیکوم جدا شده از گوسفند، بز و گاو در استان مازندران

سابقه و هدف: دیکروسلیازیس بیماری شایع در نشخوارکنندگان است که توسط گونه های مختلف دیکروسلیوم ایجاد می شود. این انگل در مجاری صفراوی و کیسه صفرای نشخوارکنندگان و به طور تصادفی انسان دیده می‌شود. اهمیت اقتصادی دیکروسلیازیس به علت خسارت به کبد و در نتیجه از دست دادن مقادیر قابل توجهی از مواد پروتئینی می باشد. بنابراین هدف از این مطالعه، بررسی پارامترهای مورفومتریک و مولکولی (pcr و pcr-rflp) ایزوله‌های گوسفندی، بزی و گاوی دیکروسلیوم دندرتیکوم در استان مازندران در سال‌های 1392-1394 می‌باشد.مواد و روش‌ها: در این مطالعه توصیفی، در مجموع 50 ایزوله ترماتود از کبدهای گوسفندی (20 مورد)، بزی (20 مورد) و گاوی (10 مورد)، از کشتارگاه‌های مازندران جمع آوری شدند. کرم های بالغ با روش‌های مورفومتریک و مولکولی ناحیه 28s rdna مورد بررسی قرار گرفتند. برای تشخیص گونه ی انگل از تکنیک pcr-rflp استفاده شد. علاوه بر این، تعدادی از نمونه ها تعیین توالی شدند.یافته‌ها: تمام ایزوله های سه میزبان (گوسفند، بز و گاو) در اغلب شاخصه های مرفولوژیک با هم اختلاف معنی‌دار داشتند. در مورد شاخص بیضه‌های انگل، که شاخص قابل اعتمادی برای تشخیص افتراقی گونه‌های دیکروسلیوم می‌باشد، در تمام ایزوله‌ها، بیضه‌ها پشت سر هم قرار داشتند و اختلاف معنی‌داری در اندازه آن‌ها در بین میزبانان مختلف مشاهده نشد. در بررسی مولکولی چهار باند bp116، bp145، bp 393 و bp409 از محصول pcr بعد از تماس با آنزیم مشاهده شد. در بررسی توالی ایزوله های انگل، اختلاف ژنتیکی چندانی دیده نشد، در حالی که در بررسی مورفومتریک، تفاوت‌هایی مشاهده شد.استنتاج: بررسی های مولکولی و مورفومتریک نشان داد که دیکروسلیوم دندریتیکوم تنها گونه ی آلوده کننده‌ی گوسفند، بز و گاو در استان مازندران است.

Morphological and Molecular (28s rDNA) Characterization of Dicrocoelium dendriticum Isolates from Sheep, Goat and Cattle in Mazandaran Province, Iran

Background and purpose: Dicrocoeliasis is a prevalent parasite in ruminants caused by different species of Dicrocoelium spp. This parasite lives in bile duct and gallbladder of ruminants and accidentally in human. The economic significance of dicroceliasis is due to direct damage to the liver and, consequently, to the loss of significant amounts of protein. The present study aimed to investigate the morphometric and molecular (PCR and PCR-RFLP) parameters of Dicrocoelium species isolates from sheep, goat, and cattle in Mazandaran province, Iran during 20132015.Materials and methods: In this descriptive study, 50 trematodes isolated from livers of sheep (n= 20), goat (n= 20), and cattle (n= 10) were collected form abattoirs in Mazandaran province. Adult worms were studied by morphometric and molecular methods on 28s rDNA. The RFLP technique was used to identify the genus. Some samples were also sequenced.Results: All isolates of three hosts (sheep, goat, and cattle) showed significant differences in many morphological parameters. According to characterization of testicles that is a remarkable characteristic for differential diagnosis of Dicrocoelium species, they were in tandem position in all isolates. Moreover, no significant difference was observed in their size in different hosts. Four bands, including 116, 145, 393, and 409 bp were produced from PCR method after treatment by enzyme. In molecular technique, there were no any significant differences but in morphometric analysis, some differences were found.Conclusion: The molecular and morphometric results indicated that D. dendriticum is the only species infecting sheep, goat, and cattle in Mazandaran province.