ارزیابی اثر پپتید کایمریک سکروپین-ملیتین (cm11) بر روی تروفوزوئیت ژیاردیا لامبلیا در شرایط برون تنی

سابقه و هدف: پپتیدهای ضدمیکروبی، یکی از متنوع ترین ترکیبات ضدمیکروبی هستند که به دلیل پیدایش مقاومت عوامل بیماری زا به آنتی‌بیوتیک های رایج مورد توجه قرار گرفته اند. با این وجود در مطالعات اندکی خواص ضد انگلی آن ها مورد بررسی قرار گرفته است. مطالعه پیش رو با هدف مقایسه اثرات پپتید کایمریک ملیتین-سکروپین (cm11) و مترونیدازول بر روی تروفوزوئیت ژیاردیا لامبلیا صورت گرفته است.مواد و روش‌ها: در این تحقیق تجربی، با استفاده از آزمایش mtt، سمیت سلولی پپتید cm11 در غلظت‌های μg/ml 0.325 و مترونیدازول در غلظت‌های μg/ml20-0.25 بر روی سلول caco2 بررسی و ic50 محاسبه گردید. جهت تعیین میزان آپوپتوز القایی cm11 و مترونیدازول از روش فلوسایتومتری استفاده شد. سمیت دارویی پپتید بر روی تروفوزئیت ژیاردیا لامبلیا در شرایط مختلف برون‌تنی مورد بررسی قرار گرفت.یافته‌ها: نتایج mtt نشان داد که بالاترین درصد کشندگی بر روی سلول caco2، در گروه پپتید cm11 در غلظت μg/ml32 پس ازگذشت 24، 48 و 72 ساعت به ترتیب 1.2 ±84.3، 0.9 ±88.7 و 1.5 ±87 درصد بود، در حالی که در گروه مترونیدازول در غلظت μg/ml 20 پس از گذشت 24، 48 و 72 ساعت به ترتیب 2.3 ±35، 1.2 ±39.3 و 1.8±48.3 درصد بود. در بالاترین غلظت مورد استفاده طی 24 و 48 ساعت، بالاترین درصد کشندگی بر روی انگل در گروه پپتید و مترونیدازول به ترتیب 0.2 ±99.8 و 0.6 ±99 درصد بود. میزان کشندگی پپتید و مترونیدازول بر روی انگل‌های متصل به سلول در بالاترین غلظت به ترتیب 0.1±99.7 و 0.3 ±99.5 درصد بود.استنتاج: نتایج این تحقیق نشان داد که پپتید کایمریک سکروپین-ملیتین (cm11) می‌تواند کاندید مناسبی جهت درمان ژیاردیازیس باشد.

Effect of Cecropin–melittin Chimeric Peptide (CM11) on Trophozoite of Giardia lamblia In Vitro

Background and purpose: Antimicrobial peptides (AMP) are one of the most diverse antimicrobial compounds that have received much attention due to the development of drug resistance of pathogens to conventional antibiotics. But, few studies have evaluated antiparasitic properties of AMP. The present study was conducted to compare the effect of a cecropin -melittin chimeric peptide (CM11) and metronidazole on Giardia lamblia trophozoite.Materials and methods: In this study, using MTT assay, the cytotoxicity of CM11 peptide (0.532 μg/ml) and metronidazole (0.2525 μg/ml) was investigated on Caco2 cells and IC50 was calculated. Flow cytometry was used to determine the rate of induction of apoptosis by CM11 and metronidazole. The toxicity of peptide on G. lamblia trophozitis was evaluated in vitro under different conditions.Results: MTT results showed that the highest percentage of cytotoxicity in caco2 cells was seen at 32 μg/ml of CM11 peptide after 24 (84.3 ±1.2%), 48 (88.7 ±0.9%) and 72 (87 ±1.5%) hours. In metronidazole group, the highest cytotoxicity was observed in 20 μg/ml after 24 (35 ±2.3), 48 (39.3 ±1.2) and 72 (48.3 ±1.8%) hours. The highest concentrations of peptide (32 μg/ml) and metronidazole (20 μg/ml) showed 99.8 ±0.2% and 99 ±0.6% cytotoxicity effect, respectively. The cytotoxicity effect of peptide and metronidazole on G. lamblia attached to caco2 cells at highest concentrations were 99.7 ±0.1% and 99.5 ±0.3%, respectively.Conclusion: This study showed that cecropinmelittin chimeric peptide could be an appropriate candidate for the treatment of giardiasis.