بررسی نقش mir-429 با میزان بیان ژن e2f3در رده سرطان پستان

سابقه و هدف: یکی از عوامل کنترل کننده بسیاری از اجزای سلولی و عملکرد های بیولوژیک در سطح اپی ژنتیک، microrna ها می ‌باشند. mir429 جزو خانواده mir200 بوده و در متاستاز سرطان دخالت دارد. مطالعات بسیاری ارتباط mir429 را با سرطان کبد، مثانه، روده و معده بررسی کرده‌‌اند. این مطالعه با هدف تغییر بیان ژن e2f3 پس از ترانسفکت کردن سلول‌های mcf7 با وکتورهای premir429 و antimir429 به عنوان هدف احتمالی mir429، انجام پذیرفت.مواد و روش‌ها: در این مطالعه تجربی، با استفاده از پایگاه های داده‌ mir و ابزار های بیوانفورماتیکی e2f3 به عنوان هدف mir429 پیش‌بینی شد. سپس سلول‌های mcf7 با دو وکتور premir429 و antimir429 ترانسفکت شدند. پس از گذشت 48 ساعت، استخراج rna و سنتز cdna انجام شد. میزان بیان mir429 و ژن هدف با استفاده از روش realtime pcr بررسی شد.یافته‌ها: نتایج حاصل از مقایسه گروه سلول‌های ترانسفکت نشده، ترانسفکت ‌شده با premir429 و ترانسفکت شده با antimir 429 نشان دهنده افزایش بیان ژن هدف در اثر ترانسفکشن با antimir429 (9.38 برابر) و کاهش بیان در اثر ترانسفکشن با premir429 می‌باشد (5.3 برابر).استنتاج: کاهش بیان mir429 در متاستاز به استخوان در سرطان پستان نقش داشته و در تومور تخمدان و کارسینومای کولورکتال کاهش بیان آن باعث کاهش متاستاز و تهاجم می گردد. در مطالعه حاضر نشان داده شد که میزان بیان e2f3 در اثر ترنسفکت با premir429 کاهش و با antimir429 افزایش می‌یابد، بنابراین mir429 می‌تواند به عنوان ساپرس‌کننده تومور در سرطان پستان از طریق مهار e2f3 عمل کند.

The Role of MicroRNA-429 in E2F3 Expression in Breast Cancer Cell Lines

Background and purpose: MicroRNA regulation of cancerrelated pathways has a major effect on cancer development. MiR429 is a member of miR200 family with an important role in metastasis. There are many studies on the association between miR429 and liver, bladder, bowel, and gastric cancers. In this study, we investigated the expression changes of E2F3 genes after transfection of MCF7 cells using premiR429 and antimiR429 as the potential targets of miR429.Materials and methods: In this experimental study, E2F3 was predicted as the potential target of miR429 using using miRNA bioinformatics tools. MCF7 cells were then transfected with both mir429 precursor and inhibitory vectors. RNA extraction and cDNA synthesis were done after 48 hr. Expression of miR429 and target gene were determined by qRTPCR.Results: The comparison between the results of untransfected cells group, transfected with premiR429 group, and transfected with antimiR429 group showed that downregulation of miR429, increased the expression level of E2F3 in cells transfected with miR429 inhibitory vector (9.38 folds). Expression level of E2F3 decreased in cells transfected with premiR429 vector (5.3 folds).Conclusion: Low expression level of miR429 in breast cancer was found to be effective in bone metastasis, although in ovarian cancer and colorectal carcinoma, resulted in decreasing invasion and matastasis. In current study, the expression level of E2F3 decreased when transfected with premiR429 vector and increased when transfected with antimiR429 vector, therefore, miR429 could be a potential target in breast cancer therapy.