بررسی قدرت تشخیصی روشهای ایمونوفلئورسانس مستقیم( (dfaو رنگ آمیزی گیمسا در مقایسه با روش pcr ژن omp1 جهت شناسایی کلامیدیا تراکوماتیس در نمونه ملتحمه بیماران مبتلا به کونژنکتیویت فولیکولار مراجعه کننده به بیمارستان فارابی در سال 1392

سابقه و هدف: کلامیدیا تراکوماتیس یک باکتری داخل سلولی اجباری با اهمیت کلینیکی بالا میباشد که عفونتهای انسانی ناشی از این باکتری ترجیحاً چشمها و دستگاه تناسلی را گرفتار میکنند. کلامیدیا تراکوماتیس، شایعترین عامل کونژنکتیویت فولیکولار مزمن و عامل 20 درصد موارد کونژنکتیویت حاد می باشد. از آنجاییکه تشخیص سریع می تواند در کاهش عوارض طولانی مدت بیماری موثر باشد در این تحقیق ما بر آن شدیم که روشهای مختلف تشخیص کلامیدیا شامل رنگ آمیزی گیمسا، dif (ایمونوفلورسانس مستقیم) و pcr ژن omp1 را در مورد نمونه های ملتحمه بیماران مبتلا به کونژنکتیویت فولیکولار مراجعه کننده به بیمارستان فارابی در سال 1392 را مورد بررسی قرار دهیم.روش بررسی: در این مطالعه توصیفی تشخیصی از نمونه 90 بیمار مبتلا به کونژنکتیویت فولیکولار که در سال 1392 به آزمایشگاه بیمارستان فارابی مراجعه کرده بودند، استفاده شد. نمونه گیری با توجه به معیارهای ارائه شده از طرف سازمان بهداشت جهانی، با استفاده از اسکراپ و از سطح ملتحمه فوقانی بیمار انجام شد. در رنگ آمیزی گیمسا انکلوزیون ها به رنگ ارغوانی دیده شدند. در dif اجسام اولیه و انکلوزیون بادی پس از رنگ آمیزی با آنتی بادی کونژوگه با فلورسئین به صورت فلورسانس سبز رنگ با میکروسکوپ ایمونوفلورسنس دیده شدند. pcr با پرایمرهای ct1 ، ct5 جهت شناسایی ژن omp1 بر روی dna استخراج شده از نمونه ها انجام شد. نتایج با الکتروفورز بر روی ژل آگارز 1/5% مشخص شد.یافته ها: از 90 بیمار با علائم کونژنکتیویت فولیکولار در 28 نفر (31/1%) با روشهای ایمونوفلورسانس مستقیم و در 13 نفر (14/4%) با استفاده از رنگ آمیزی گیمسا و در 35 نفر (38/8%) با روشpcr ژن omp1 ، عفونت کلامیدیایی مورد شناسایی قرار گرفت. حساسیت و اختصاصیت و ارزش اخباری مثبت و منفی روش ایمونوفلورسانس مستقیم در مقایسه با pcr به ترتیب معادل 88/33، 001، 001، 88/70 درصد و حساسیت و اختصاصیت و ارزش اخباری مثبت و منفی روش رنگ آمیزی گیمسا در مقایسه با pcr به ترتیب معادل 61/46، 100، 100، 71/22درصد محاسبه شد. بنابراین حساسیت و ارزش اخباری منفی روش ایمونوفلورسانس بصورت معنی داری بالاتر از روش گیمسا بود.نتیجه گیری: با توجه به مطالعه انجام شده ایمونوفلورسانس مستقیم در مقایسه با رنگ آمیزی گیمسا جهت تشخیص کونژنکتیویت فولیکولار کلامیدیایی روشی حساس تر و قابل اعتماد تر می باشد.

Analysis of the dDiagnostic pPower of dDirect immunofluorescence (DIF) method and Giemsa staining in cComparison to the PCR method for detection of Chlamydia trachomatis in the cConjunctiva sSamples of pPatients with follicular conjunctivitis referred to Farabi hospital in 1392

Background and Aim: Chlamydia trachomatis is an obligate intracellular parasite responsible for ocular and genital infections in human. Chlamydia trachomatis is the most common cause of chronic follicular conjunctivitis and is also responsible for 20% of acute conjunctivitis cases. As a rapid diagnosis is important in the reducing the longterm squeal of the diseases, the objective of this study was to compare three methods including direct immunofluorescence (DIF) method, Giemsa staining and PCR for detection of chlamydia trachomatis in patients with follicular conjunctivitis referred to Farabi hospital in 1392.nbsp;Material and methods: Conjunctival scraping (n=90) was obtained from patients who were referred to the diagnostic laboratory of Farabi hospital during 2012. Smears were prepared by rolling half the swab on to the center of a glass slide. Smears were fixed and used for direct immunofluorescence (DIF) method using a genus specific fluorescein isothiocyanate labelled chlamydia monoclonal antibody. In Giemsa stain, diagnosis was based on the presence of inclusions that were basophilic and stained pinkishblue. PCR amplification after Extraction performed using CT1 and CT5 primers designed from Omp1 gene.Results: From the 90 patients examined for Chlamydia trachomatis in the eyes, 28 (31.1%) were positive by DIF and 13 (14.4%) by Giemsa staining; and 35 patients (38.8%) showed positive results in PCR. Sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive value of DIF in comparison to PCR respectively were calculated as 88.33, 100, 100 and 88.70. Sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive value of DIF in comparison to PCR respectively were calculated as 61.40, 100, 100 and 71.42. Therefore, sensitivity and negative predictive value of DIF are significantly higher than Giemsa staining.Conclusion: According to results of this study, DIF is more sensitive and more reliable than Giemsa staining for detection of Chlamydia trachomatis in the conjunctiva samples of patients with follicular conjunctivitis.nbsp;