بررسی تغییر ژن پروتئین m2 ویروس آنفلوانزا h1n1 در بیان آن درباکتری ecoli سویه bl21

سابقه و هدف: با توجه به اهمیت توالی ژن و کدونهای مربوط به هر اسید آمینه در میزبان بیان کننده پروتئین، همچنین به منظور تولید احتمالی واکسن بر علیه انفلوانزا a، یکی از عوامل اصلی مرگ ومیر سالیانه در جهان، این تحقیق انجام گرفته است. پروتئین m2 حفاظت شده است و بعد از تغییر در توالی آن به نظر میرسد هدف مناسبی برای تولید واکسن انفلوانزا در نظر گرفته شود. روش بررسی: تحقیق به روش تجربی انجام شد. توالی ژن m2 از ویروس سویه h1n1 ایران انتخاب و بعد از اعمال تغییرات جهت بیان بهتر در باکتری ecoli سنتز شد.سپس در وکتور pet22b ساب کلون گردید. پروتئین نوترکیب در باکتری e.coli سویه bl21de3 بیان و از آنتی بادی اختصاصی در روش وسترن بلات برای تایید آن استفاده شد. یافته ها: ecoli با تغییر اعمال شده قادر به بیان پروتئین m2 باغلظت 300 میکروگرم در هر میلی لیتر بود و با آنتی بادی اختصاصی نیز ماهیت آن تایید گردید. نتیجه گیری: پروتئین m2 ویروس آنفلوانزا با تغییراتی در توالی آن در باکتری ecoli سویه bl21 قابل بیان است.

Evaluation of Modification in M2 gene of Influenza H1N1 virus in Expression of it in BL21 Ecoli

Aim and Background: By Attention to gene sequence and each amino acid codon in host which express protein, also in order to probable vaccine production against influenza A, a major cause of mortality in a year,this research was carried out. M2 protein is conserved and it can be a proper candidate vaccine for influenza infection. Materials and Methods: Present research was an experimental study. The sequence of M2 protein of Iran influenza virus H1N1 strain was modified and synthesized. It was subcloned into pET22b vector recombinant protein and expressed in BL21 Ecoli and confirmed with specific antibody by western blot technique. Results: The modified M2 gene was expressed in Ecoli. The concentration of it was 300mu;g/ml and it was confirmed by western blotting with specific antibody. Conclusion: Influenza M2 protein with modification in sequence could be expressed in BL21 Ecoli host.