بررسی اثر تماس مستقیم سلولهایt بکر با سلولهای فیبروبلاست تحریک شده با bcg بر القای سلولهایt تنظیمی

سابقه و هدف: فیبروبلاست های استرو مایی گره لنفی در ارتباط تنگاتنگ با سلول های cd4+ t قرار دارند و بر فنوتیپ و عملکرد آن ها اثر می گذارند. آگاهی از نحوه میان کنش این سلول ها به ویژه در شرایط ناپایدار همچون عفونت ها، به استفاده های بعدی از آن ها در کنترل و تنظیم پاسخ های ایمنی کمک خواهد کرد.روش بررسی: سلول های فیبروبلاست گره لنفی به دو روش in vitro و in vivo، در محیط ایمنی واجد bcg، قرار داده شدند. فیبروبلاست ها به روش هضم آنزیمی و مارکرهای اختصاصی سطحی، جداشدند و به مدت 72 ساعت با لنفوسیت های t بکر به روش تماس مستقیم هم کشتی شدند. سپس لنفوسیت های t جدا شدند و پس از 72 ساعت کشت از نظر میزان بیان مارکرهای t تنظیمی و سایتوکاین های il10, tgf beta;1, il4 و ifn gamma; بررسی شدند.یافته ها: میزان القای سلول های t تنظیمی توسط فیبروبلاست های تحریک شده با bcg در روش in vivo بیش از فیبروبلاست های تحریک نشده است. در این روش میزان سایتوکاین ifn gamma; کاهش و سایتوکاین های تنظیمی tgf beta;1 و il10 افزایش داشت. درحالی که میزان القای سلول های t تنظیمی توسط فیبروبلاست های تحریک شده با bcg در روش in vitroبه طور معناداری کمتر از فیبروبلاست های تحریک نشده بود. در این روش علاوه بر سایتوکاین تنظیمی il10، سایتوکاین ifn gamma; نیز افزایش داشت که نشان دهنده القای جمعیت سلول های t مولدifn gamma; است.نتیجه گیری: سلول های فیبروبلاست نه تنها بر القای سلول های t تنظیمی از سلول های t بکر و عملکرد لنفوسیت های t اثر می گذارند، میان کنش آن ها با لنفوسیت های t متاثر از محیط است. در این بررسی فیبروبلاست ها در دو محیط ایمنی متفاوت در حضور bcg قرار داشتند که در روشin vivo، به افزایش پاسخ تنظیمی و در روشin vitro به کاهش سلول های t تنظیمی منجر شد. به نظر می رسد تفاوت رفتار فیبروبلاست ها در مراحل مختلف عفونت باشد.

Study the effect of cell-to-cell contact of naive T cells and BCG stimulated fibroblasts on regulatory T cell induction

Background: Lymph node stromal fibroblasts are interconnected with TCD4+ cells and affect their phenotype and function. Understanding the nature of these interactions under unusual conditions like infections will help to their application in control and regulation of immune responses.Materials and methods: Lymph node fibroblasts were affected in BCG primed immune environment by both invitro and in vivo method. Fibroblasts isolated through enzymatic digestion and surface markers and cocultured with spleen isolated naive T cells for 72hours in a celltocell contact manner. Then naive T cells were removed and cultured 72hours more and assessed for regulatory T cell marker expression and IL4, TGFbeta;1, IL10 and IFNgamma; cytokine production.Results: Results showed that in invivo stimulation method, more regulatory T cells was induced by BCG stimulated fibroblasts compared to nonstimulated fibroblasts. In this method, IFNgamma; cytokine production was reduced and IL10 and TGFbeta;1 regulatory cytokine production was increased. In contrast, in invitro stimulation method, regulatory T cell induction by BCG stimulated fibroblasts was significantly less than nonstimulated ones. In addition, both IL10 and IFNgamma; production was increased that indicate induction of IFNgamma; producing Tcells.Conclusion: Present study shows that fibroblasts affect regulatory Tcell induction and Tcell function. The result of this effect is dependent to environment. In this study, fibroblasts were isolated from two different BCG stimulated immune environment. They induced more regulatory responses in invivo condition and reduced regulatory responses in invitro environment. This result demonstrates different fibroblast behavior at different phases of infection.