محیط کشت بهینه سلول‌های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان انسان و تابش لیزر کم توان موجب افزایش بیان فاکتور رشد در فیبروبلاست‌های دیابتی می‌شوند

سابقه و هدف: زخم های مزمن در افراد دیابتی به دلایل مختلف، از جمله اختلال در روند تولید و ترشح فاکتورهای موثر در فرآیند التیام زخم، بسیار مورد توجه قرار گرفته است. در سال های اخیر مطالعه های زیادی تاثیر مثبت تابش لیزر کم توان و استفاده از سلول های بنیادی مزانشیمی ومحیط کشت بهینه آن ها را در التیام زخم های دیابتی گزارش کرده اند. در مطالعه حاضر ما تاثیر ترکیبی لیزر کم توان و محیط کشت بهینه سلول بنیادی مزانشیمی مغز استخوان را بر بیان یک فاکتور التهابی و یک فاکتور رشد که هر دو در روند ترمیم زخم شرکت دارند، در فیبروبلاست های کشت شده در غلظت بالای گلوکز را بررسی کردیم.روش بررسی: در این مطالعه تجربی، سلول های فیبروبلاست پوست انسان در محیط کشت حاوی غلظت طبیعی و غلظت بالای گلوکز (مدل دیابتی) کشت داده شدند. سپس از تابش لیزر با انرژی 5/0 ژول بر سانتی متر مربع و محیط کشت بهینه سلول های بنیادی مزانشیمی، به صورت جداگانه و توام با یکدیگر برای تیمار فیبروبلاست های دیابتی استفاده شد. سرانجام میزان بیان ژن فاکتورهایbfgf و tgf beta;2با استفاده از تکنیک rtpcr بررسی شد.یافته ها: بیان ژن b fgf به طور معنادار و بیان ژن tgf beta;2به طور غیر معنادار در هر سه گروه دیابتی تیمار شده، نسبت به گروه دیابتی تیمار نشده افزایش یافته بود. به نحوی که میزان بیان نسبی ژن bfgf از 0/11±0/74 در گروه دیابتی به 0/35 ±1/32 در گروه تیمار شده با لیزر، 0/028 ±0/89 در گروه تیمار شده با محیط کشت بهینه و 0/2 ±1/73 در گروه تیمار هم زمان با لیزر و محیط کشت بهینه افزایش یافت و همه این تغییرها در سطح p <0. 05 معنادار بود.نتیجه گیری: به نظر می رسد که استفاده هم زمان از تابش لیزر کم توان و محیط کشت بهینه مشتق از سلول های بنیادی مزانشیمی انسان، با اثر هم افزایی که بر یکدیگر دارند، موجب می شود بیان فاکتور رشد موثر در ترمیم زخم پوستی دیابتی افزایش چشمگیری یابد.

Human-bone marrow mesenchymal stem cells-conditioned medium and low-level laser therapy increase trophic factor expression in diabetic fibroblasts

Background and Aim: Chronic wounds of diabetic patients, which resulted from some impairments including disruption in production and secretion of effective factors in the process of healing is highly regarded. In recent years, many studies have been reported the positive impact of low level laser therapy (LLLT) and mesenchymal stem cells (MSCs) and their conditioned media (CM) in diabetic wound healing. In the present study we evaluated the combined effect of LLLT and humanbone marrow (hBM) MSCsCM on the expression of an inflammatory factor and a growth factor, both involved in wound healing, in cultured fibroblasts at high glucose condition.Materials and Methods: In this experimental study human dermal fibroblasts (HDFs) were cultured at culture media with normal and high glucose (as diabetic model) concentrations. Then the diabetic fibroblasts were treated by a laser beam with 0.5J/cm2 and hBMMSCsCM, separately and in combination with each other. Finally, the gene expression of bFGF and TGFbeta;2 were evaluated, using RTPCR technique.Result: The expression of bFGF, significantly and the expression of TGFbeta;2, nonsignificantly were increased in all three treated diabetic groups, compared to the untreated diabetic group. Despite the relative expression of bFGF in diabetic group was 0.47plusmn;0.11. It significantly (p0.05) rose to 1.23plusmn;0.35 in laser treated group, 0.98plusmn;0.028 in CM treated group and 1.37plusmn;0.2 in Lasr+CM treated group.Conclusion: Apparently, by their synergistically effects, using the LLLT and the hBMMSCsCM together, positively affect the expression of tropic factor involved in diabetic wound healing.