بررسی اثر آنالوگ کورکومین بر تجمع چربی و بیان ژن‌های sirt1 و fasدر سلول‌های hepg2

سابقه و هدف: کبد چرب غیر الکلی بیماری است که در صورت درمان نشدن به سیروز کبد منجر خواهد شد. کورکومین ماده موثره ریزوم گیاه زردچوبه است که دارای خواص آنتی اکسیدانی ضد التهابی ضد میکروبی و ... است. در مطالعه حاضر اثرات آنالوگ کورکومین (fcur) بر بیان ژن های sirt1 و fas و تجمع تری گلیسیریدها در سلول های hepg2 چرب شده (مدل کبد چرب) بررسی شده است. روش کار: در این مطالعه تجربی، پس از کشت سلول های hepg2در محیط و شرایط مناسب، به منظور انتخاب دوز مناسب برای کورکومین و آنالوگ آن از تستmtt استفاده شد. پس از چرب کردن سلول ها و تیمار آن ها با ترکیبات مورد نظر rna استخراج و cdna ساخته شد. سپس به منظور بررسی اثر کورکومین و آنالوگ آن روی بیان ژن های sirt1 و fas از real- time pcr استفاده شد. فعالیت sirt1 با استفاده از یک کیت فلوئورومتریک و میزان تری گلیسیرید داخل سلولی با استفاده از کیت تشخیص تری گلیسیرید نیز اندازه گیری شد و در نهایت به دلیل مقایسه بین بیش از دو گروه با یکدیگر نتایج با روش آماری t- test وone way anova با 0.05>p-value آنالیز قرار گرفت. یافته ها: در اثر تیمار سلول های چرب شده hepg2 (مدل کبد چرب) با cur، بیان نسبی ژن sirt1 (0/8 ± 1/52) و فعالیت آنزیمی آن ( 0/7 ± 2/1) نسبت به گروه کنترل ( برای بیان ژن: 1/79 ± 0/9 و برای فعالیت آنزیمی: 1/66 ± 0/8) به طور معنا داری، افزایش داشته است. در مقابل بیان نسبی ژن fas (1/69 ± 0/6) نسبت به گروه کنترل (2/03 ± 0/8) و همچنین تری گلیسیریدهای تجمع یافته درون این سلول ها به طور معناداری کاهش داشته است. همچنین در گروه تیمار شده با fcur در مقایسه با گروه کنترل میزان بیان ژن (1/16 ± 2/76) و فعالیت آنزیمی (1/21 ± 3/2) sirt1 به طور معنا داری افزایش یافته است و میزان بیان ژن fas (1/1 ± 0/2) در مقایسه با گروه کنترل کاهش معناداری داشته است. فعالیت آنزیمی sirt1 در گروه fcur نسبت به cur افزایش بیشتری داشته است، همچنین کاهش بیان ژن fas در تیمار سلول ها با fcur در مقایسه با cur به طورقابل ملاحظه ای بیشتر بوده است. کاهش چربی داخل سلولی در اثر تیمار با fcur در مقایسه با تیمار با cur، تا حدودی بیشتر بود. (در تمام ارزیابی ها، برای کورکومین p-value <0.01و برای مشتق آن p-value <0.001 است). نتیجه گیری: به نظر می رسد که آنالوگ کورکومین (fcur) با توجه به دامنه وسیعی از فعالیت های فارماکولوژیک آن از جمله آثار آن روی متابولیسم لیپید در کبد، می توان به عنوان یک مکمل دارویی در درمان کبد چرب در کنار سایر روش های درمانی رایج بهره برد.

evaluation of the effect of curcumin analog on lipid accumulation and sirt1 and fas genes expression in hepg2 cells

background and aim: non- alcoholic fatty liver is a disease that will lead to liver cirrhosis if not treated. curcumin is the active substance of the rhizome of the turmeric plant, which has antioxidant, anti- inflammatory, antimicrobial, etc. properties. in the present study, the effects of curcumin analog on the expression of sirt1 and fas genes and the accumulation of triglycerides in fatty hepg2 cells (fatty liver model) have been investigated. methods: in this experimental study, after cultivating hepg2 cells in the right medium and conditions, the mtt test is used to choose the right dose for curcumin and it’s analog. after oiling the cells and treating them with the desired compounds, rna was extracted and cdna was made. then, in order to investigate the effect of curcumin and its analog on the expression of sirt1 and fas genes, real- time pcr was used. sirt1 activity was measured using a fluorometric kit and intracellular triglyceride levels were also measured using a triglyceride detection kit. and finally, the results were analyzed with t- test and one-way anova statistical methods with p-value < 0.05. results: as a result of the treatment of hepg2 fatty cells (fatty liver model) with cur, the relative expression of sirt1 gene (1.52 ± 0.8) and its enzyme activity (2.1 ± 0.7) increased significantly compared to the control group (for gene expression: 0.9 ± 1.79 and for enzyme activity: 0.8 ± 1.66). on the other hand, the relative expression of the fas gene (0.6 ± 1.69) compared to the control group (0.8 ± 2.03), as well as the accumulated triglycerides in these cells, and has decreased significantly. also, in the group treated with fcur compared to the control group, the level of sirt1 gene expression (2.76 ± 1.16) and enzyme activity (3.2 ± 1.21) increased significantly, and the level of fas gene expression (0.2 ± 1.1) decreased significantly compared to the control group. the increase in sirt1 enzyme activity in the fcur group has increased more compared to cur, and the decrease in fas gene expression in the treatment of cells with fcur has been significantly higher compared to cur. the reduction of intracellular lipid was somewhat higher in the treatment with fcur compared to the treatment with cur. (in all evaluations, p-value < 0.01 for curcumin and p-value < 0.001 for its derivative). conclusion: it seems that curcumin analog (fcur) can be used as a medicinal supplement in the treatment of fatty liver, along with other common treatment methods, due to its wide range of pharmacological activities, including its effects on lipid metabolism in the liver.