بررسی اثر نانوذرات نقره روی بیان ژن rmtb در جدایه‌های بالینی مقاوم به آمینوگلیکوزید در باکتری سودوموناس آئروژینوزا

سابقه و هدف: سودوموناس آئروژینوزا یک پاتوژن فرصت طلب است که عفونت گسترده ای در بیمارستان ها ایجاد می کند. به دلیل استفاده بی رویه از آنتی بیوتیک ها، سودوموناس آئروژینوزا به انواع آنتی بیوتیک ها مقاوم شده است. یکی از انواع مقاومت های کسب شده توسط این باکتری، مقاومت به داروهای آمینوگلیکوزید است. مهم ترین مکانیسم این مقاومت غیرفعال سازی آنزیماتیک آمینوگلیکوزیدها توسط آنزیم های تغییردهنده آن هاست. ژن rmtb در این مقاومت نقش دارد و به دلیل اینکه نانوذرات نقره خاصیت ضدباکتریایی دارند، هدف این مطالعه ارزیابی سطح بیان ژن rmtb در نمونه های سودوموناس آئروژینوزا مقاوم شده ای است که تحت تیمار نانوذرات نقره بوده اند.مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی، 53 نمونه از 11 آزمایشگاه سطح شهر مشهد در سال های 13991398 جمع آوری شدند. نمونه ها با استفاده از روش های استاندارد آزمایشگاهی و کشت اختصاصی تعیین هویت شدند. برای بررسی فراوانی ژن rmtb از روش pcr استفاده شد. برای ارزیابی الگوی حساسیت آنتی بیوتیکی سویه ها، از روش انتشار دیسک بر اساس پروتکل (2018)clsi استفاده شد. نانوذرات نقره توسط عصاره زنجبیل ساخته شدند و برای بررسی اثر نانوذرات نقره بر بیان ژن rmtbاز روش real time pcr استفاده شد. میزان مقاومت با آنتی بیوتیک های مختلف با آزمون کای دو قضاوت آماری شد.یافته ها: از 53 نمونه سودوموناس آئروژینوزا، 51 نمونه به بیش از دو آمینوگلوکوزید مقاوم بودند. ارزیابی فنوتیپی الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی سویه های سودوموناس آئروژینوزا مقاوم به آمینوگلوکوزیید نشان داد که 61 درصد به آمیکاسین، 84 درصد به جنتامایسین و 23 درصد به توبرامایسین مقاومت داشتند. همچنین از 53 نمونه، 76 درصد به هر سه آمینوگلیکوزید بررسی شده مقاوم بودند. حداقل غلظت بازدارندگی در روش رقت در آگار برای نانوذرات نقره تا رقت 500 میکروگرم بر میلی لیتر بود. بررسی ملکولی نشان دهنده حضور ژن rmtb در تمام نمونه ها بود و نتیجه بررسی real time pcr نشان داد که تاثیر نانوذرات نقره روی بیان ژن rmtb معنادار است (p<0/01).نتیجه گیری: مقاومت بالایی نسبت به آمینوگلیکوزید در نمونه های جمع آوری شده از شهر مشهد وجود داشت. نانوذرات نقره تاثیر معنادار روی کاهش بیان ژن rmtb داشتند.

effect of silver nanoparticles on rmtb gene expression in aminoglycoside resistant clinical isolates in pseudomonas aeruginosa

background and aim: pseudomonas aeruginosa is an opportunistic pathogen that causes widespread infections in hospitals. pseudomonas aeruginosa has become resistant to a variety of antibiotics due to the overuse of antibiotics. one type of resistance acquired by this bacterium is resistance to aminoglycoside drugs. the most important mechanism of this resistance is the enzymatic inactivation of aminoglycosides by their modifying enzymes. the rmtb gene is involved in this resistance and because silver nanoparticles have antibacterial properties, the present study was conducted to evaluate the expression level of rmtb gene in pseudomonas aeruginosa specimens treated with silver nanoparticles.methods: in the current study experimental, 53 samples were collected from 11 laboratories in mashhad during 13981399. samples were identified using standard laboratory methods and specific culture. pcr method was used to evaluate the frequency of rmtb gene. in order to evaluate the antibiotic susceptibility pattern of the strains, the disk diffusion method based on the clsi protocol (2018) was used. silver nanoparticles were made from ginger extract and real time pcr was used to investigate the effect of silver nanoparticles on rmtb gene expression.results: out of 53 samples of pseudomonas aeruginosa, 51 samples were resistant to more than two aminoglucosides. phenotypic evaluation of the antibiotic resistance pattern of aminoglucosideresistant pseudomonas aeruginosa strains showed that 61% were resistant to amikacin, 84% to gentamicin and 23% to tobramycin. also, out of 53 samples, 76% were resistant to all three aminoglycosides. the minimum inhibitory concentration in the agar dilution method for silver nanoparticles was up to 500 μg/ml. molecular analysis showed the presence of rmtb gene in all samples and the result of real time pcr analysis showed that the effect of silver nanoparticles on rmtb gene expression was significant (p <0.01).conclusion: there was high resistance to aminoglycoside in samples collected from mashhad. silver nanoparticles had a significant effect on reducing the expression of rmtb gene (p <0.01).