تعیین میزان فراوانی بتالاکتامازهای طیف گسترده( esbls ) در جدایه های کلبسیلا از نمونه های شیر خام و شیر مدرسه به رو شهای فنوتیپی و ژنوتیپی

سابقه و هدف: مقاومت در برابر طیف وسیعی از آنتی بیوتیک های خانواده بتالاکتام، ناشی از ظهور بتالاکتامازهای جدیدی در میان سویه های باکتریایی است. هدف از این مطالعه تعیین میزان فراوانی بتالاکتامازهای طیف گسترده ( esbls ) در جدایه های کلبسیلا از نمونه های شیرخام و شیر مدرسه به رو شهای فنوتیپی و ژنوتیپی بوده است.مواد و روش ها: در یک مطالعه توصیفی مقطعی، 200 نمونه شیرخام و شیر مدرسه از نظر وجود کلبسیلا روی محیط هکتون آگار بررسی شدند. کلنی های مشکوک به کلبسیلا پس از تایید با آزمون های افتراقی، برای غربالگری اولیه ارگانیسم های تولیدکننده esbl ، از آزمون روش انتشار در آگار استفاده شد. تایید نهایی با pcrانجام شد.یافته ها: در این مطالعه از 200نمونه، مجموع 44 کلبسیلا، 23 جدایه ( 72/7 درصد) از شیرخام و 21 جدایه (3/ 72 درصد)از شیرهای مدرسه جدا شد. بر این اساس 41 ( 13/8 درصد) جدایه که حداقل به یکی از آنتی بیوتیک های سفتازیدیم و سفوتاکسیم مقاوم بودند، برای تست تاییدی انتخاب شدند. در آزمایش ،rcp xelpitlumاز میان شش( 3درصد) جدایه غربال شده در تست تاییدی(پنج شیر خام و یک شیر مدرسه)، چهار( 2درصد) و یک ( 5/ 0درصد) جدایه به ترتیب حاوی ژنهای ،met ahd و دو( 1درصد) و یک ( 5/ 0درصد) جدایه به ترتیب حاوی ژن های vhs و ژن mtic بودند.نتیجه گیری: شناسایی سویه های مولد این آنزیم ها از طریق تست های فنوتیپی به سختی امکان پذیر است، بنابراین لحاظ کردن بررسی های مولکولی با استفاده از پرایمرهای فراگیر( lasrevinu ) در کنار آزمون فنوتیپی می تواند در تشخیص کامل این نوع مقاومت ها موثر بوده و سهم عمده ای را در کنترل عفونت ایفا کنند.

Determination of frequency of Extended Spectrum Beta Lactamase (ESBL) of Klebsiella isolated from raw and school milk samples using phenotypic and genotypic Methods

Background and Aim: Resistance to a wide range of betalactam family antibiotics is due to theemergence of new betalactamases among bacterial strains. The aim of the present study was todetermine the prevalence of ESBLs in Klebsiella speices isolated from raw and pasteurized schoolmilk using phenotypic and genotypic methods.Materials and Methods: In a descriptive crosssectional study, 200 samples of raw and pasteurizedschool milk were analyzed for the presence of Klebsiella spp. Samples were grown on Hektoenenteric agar medium. Suspected colonies of Klebsiella spp. were confirmed running differentialtests. For the initial screening of ESBL producing organisms, the Disk Diffusion Agar method (DDA) was used. Final confirmation was done using PCR.Results: Out of 200 samples tested, 44 isolates were identified as Klebsiella, 32 isolates (72.7%)from raw and 12 (27.3%) from pasteurized school milk. In general, 14 (31.8%) isolates that wereresistant to at least ceftazidime or cefotaxime antibiotics were selected for confirmatory testing.In Multiplex PCR assay, 6 (3%) isolates were screened for the confirmatory test (5 raw and 1pasteurized school milk). Out of 6 isolates, 4 (2%) and 1 (0.5%) isolates contained TEM and DHAgenes, and 2 (1%) and 1 (0.5%) isolates contained SHV and CITM genes, respectively.Conclusion: It is difficult to identify the enzymes producing strains through the phenotypic tests; therefore, the inclusion of molecular probes using universal primers along with phenotypic tests canbe used for the detection of these types of resistance, which play a major role in infection control.