بررسی مورفولوژیکی و مولکولی کک‌های کتنوسفالیدس جدا شده از سگ‌های ولگرد شهر تهران

زمینۀ مطالعه: تاکنون گونه‌های مختلفی از انگل‌های خارجی از سگ گزارش شده‌اند که در این میان کک‌ها از اهمیت قابل توجهی برخوردارند و شناسایی صحیح آن‌‌ها می‌تواند به لحاظ بهداشتی ما را در کنترل این انگل خارجی یاری کند.هدف: با توجه به عدم شناسایی دقیق کک‌ها، در مطالعه حاضر سعی در شناسایی کک‌های کتنوسفالیدس به دو روش مورفولوژیکی و مولکولی شده است.روش‎کار: در مطالعه حاضر ابتدا سگ‌های ارجاع شده به بیمارستان دامپزشکی دانشگاه تهران مورد بررسی قرار گرفتند، سپس نسبت به جمع آوری و شناسایی کک‌های جدا شده از سگ‌ها اقدام شد. شناسایی مورفولوژیک توسط میکروسکوپ و کلید‌های تشخیصی انجام شد و مطالعه مولکولی با استفاده از روش pcr و تکثیر ژن cox1 کک‌های کتنوسفالیدس انجام شد. در مرحله بعد شناسایی با استفاده از آزمایش rflp و تعیین ترادف بازی صورت گرفت.نتایج: در مطالعه حاضر از20 قلاده سگ آلوده به کک، 605 عدد کک جداسازی شد. در مطالعات مورفولوژیک، سه گونه کتنوسفالیدس فلیس، کتنوسفالیدس کنیس و پولکس ایریتانس شناسایی گردید. از لحاظ مولکولی نیز قطعه‌ای به طول 552 جفت بازی از ژن cox1 کک‌های کتنوسفالیدس تکثیر و روی ژل ظاهر شد. پس از تعیین توالی، مشخص گردید که در توالی جایگاه ژنی cox1، دو گونه کتنوسفالیدس فلیس وکتنوسفالیدس کنیس ‌99‌ درصد مشابهت وجود دارد. در آزمایش pcr-rflp که از آنزیم taq1 برای تفکیک دو گونه استفاده شد، نتایج برای هر دو گونه مشابه بود.نتیجه گیری نهایی: گرچه این دو گونه کک سگ از لحاظ مورفولوژی قابل تفکیک می‎باشند ولی تشخیص مولکولی آن‌‌ها با استفاده از ژن‌های cox1 موفقیت‌آمیز نبوده است.

Morphological and Molecular Study on Ctenocephalides Fleas Isolated from Stray Dogs in Tehran

BACKGROUND: Various flea species have already been reported from dogs, among which the most important ones include Ct. felis, Ct. canis, and P. irritans. Fleas can cause annoyance in dogs and human and transmit a variety of bacterial, fungal, and viral agents to the host. In addition, they could function as an intermediate host of Dipylidium caninum and Hymenolepis diminuta.  OBJECTIVES: Due to the lack of molecular speciesassociated identification data, we conducted the current study to differentiate Ct. felis and Ct. canis with molecular assay. METHODS: In the present study, 605 fleas were primarily collected from the dogs referred to Tehran Veterinary Faculty hospital. Subsequently, the flea species were identified under a microscope with morphological keys. Afterwards, COX1 genes of Ct. felis and Ct. canis were amplified via PCR and the locus was finally compared utilizing RFLP and sequencing. RESULTS: Totally, 605 fleas were isolated from 20 dogs. In morphological studies, three species were identified: Ctenocephalides felis, Ctenocephalides canis, Pulex irritans. Pulex irritans had the highest frequency (61.8 %). In molecular study, 552 bp fragment of COX1 gene in two species was amplified and seen on agarose gel. After sequencing, it was seen that two species sequences in COX1 locus had a similarity of 99 % and all of them depended on Ct. canis. In PCRRFLP, in which Taq1 enzyme was used for differentiation of two species, the same result was obtained. CONCLUSIONS: Even though these two species of dog flea are distinct morphologically, their molecular differentiation using COX1 genes was not successful.