بررسی ملکولی و سرولوژی آلودگی توکسوپلاسما در گوسفندان کشتاری شهرستان مشهد

زمینۀ مطالعه: بیماری توکسوپلاسموزیس یکی از ‌‌‌‌‌‌‌بیماری‌های مهم مشترک انسان و دام در ایران و جهان می‌باشد. هدف: با توجه به مصرف بالای گوشت گوسفند و آلودگی بالای توکسوپلاسما در گوسفندان ایران، هدف این مطالعه تعیین میزان آلودگی توکسوپلاسما در گوسفندان کشتاری مشهد با روش‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌های ملکولی و سرمی می‌باشد. روش‌کار: بدین ‌منظور از مرداد 1395 تا اردیبهشت 1396 به طور فصلی، 25 نمونه خون و 25 نمونه عضله قلب، از گوسفندان کشتارگاه طرقبه واقع در شهرستان مشهد جمع‌آوری شدند، نمونه‌های خون و عضله قلب به آزمایشکاه انگل‌شناسی منتقل گردیدند. ابتدا سرم نمونه‌های خون با استفاده ازدستگاه سانتریفیوژ جداسازی ‌شدند. سپس نمونه‌های عضله قلب برای انجام آزمایش pcr مورد نمونه‌برداری قرارگرفتند. نمونه‌های سرم و عضله تا هنگام آزمایش در داخل فریزر 20 درجه سانتی‌گراد نگهداری شدند. نمونه‌های سرم جهت یافتن آنتی‌بادی ضد توکسوپلاسما مورد آزمایش الایزا قرار گرفتند و نمونه‌های عضله قلب پس از استخراج dna با استفاده از کیت‌های تجاری، با‌روشnestedpcr  جهت تشخیص آلودگی توکسوپلاسما آزمایش شدند. نتایج: در این بررسی از مجموع 100 نمونه سرمی گرفته ‌شده، یک نمونه سرمی از گوسفندان کشتاری واجد آنتی‌بادی علیه توکسوپلاسما با روش الایزا بود، در حالی که از همین تعداد نمونه عضله قلب، 22 نمونه عضله قلب گوسفندان واکنش مثبت درآزمایش nested pcr نشان‌دادند. در این مطالعه بیشترین میزان آلودگی توکسوپلاسما در عضلات قلب در فصل بهار و کمترین میزان آلودگی در فصل تابستان گزارش‌گردید. همچنین نتایج مطالعه، نشان‌دهنده توافق ضعیف نتایج الایزا و روش مولکولی بود. نتیجه‌گیری نهایی: با توجه به تعیین میزان آلودگی قابل توجه عضلات قلب گوسفندان کشتاری به توکسوپلاسما، به نظر می‌‌ر‌سد خطر آلودگی انسان از طریق گوشت گوسفندان نسبتاً بالا می‌‌باشد.

A Molecular and Serological Study of Toxoplasma gondii Infection in Slaughtered Sheep in Mashhad Area

BACEKGROUND: Toxoplasmosisis one of the most important zoonotic diseases in Iran and the world. OBJCTIVES: Due to the high consumption of lamb meat and the high frequency of Toxoplasma infection in sheep in Iran, the aim of study was to determine frequency of Toxoplasma infection in the slaughtered sheep of Mashhad area. METHODS: In order to do this study, from summer 2015 to spring 2016, 25 blood and 25 heart muscle samples were seasonally collected from Torghabae slaughterhouse in Mashhad area. The samples were transferred to parasitology laboratory. First, the blood samples were centrifuged and the serum samples were isolated, then a portion of the heart muscles sample was taken for PCR examination. The sera and muscles samples were kept at 20 ºC in freezer until examination time. The sera samples were examined to detect antibody against T.gondii by ELISA method. DNA of heart muscle was extracted by commercial extraction kit and was examined to detect Toxoplasma DNA by nested –PCR. RESULTS: In the present study, of 100 sampled sheep, only 1 (1%) of the serum samples was seropositive, while 22 (22%) of the DNA samples were PCR positive. In this study, the highest frequency of Toxoplsma PCRPositive was seen in spring and the lowest in summer in sheep. Also, the result of this study showed that the agreement between the molecular and EISA method was “fair”. CONCLUSIONS: Based on the high frequency of Toxoplasma infection in heart muscle of sheep, it seems that the risk of transmission of Toxoplasma infection from sheep meat is high.