مطالعه وقوع نوترتیبی و حضور ژنوتیپ‌های G گاوی در روتاویروس‌های گروه A انسانی در تهران

زمینۀ مطالعه: روتاویروس‌های گروه a یکی از مهمترین عوامل مسبب گاستروانتریت و عامل 30 تا 50 درصد موارد اسهال نوزاد انسان و سایر حیوانات می‌باشند. ژنوتیپ g این ویروس‌ها بر اساس توالی ژن رمز کننده پروتئین سطحی این ویروس‌ها (vp7) تعیین شده که یکی از مهمترین عوامل القاء کننده ایمنی علیه ویروس است و نسبت به هر ژنوتیپ اختصاصی عمل می‌کند. هدف: در مطالعه حاضر احتمال وقوع ژنوتیپ‌های رایج روتاویروس a گاوی در جمعیت روتاویروس انسانی مورد بررسی قرار گرفته است. روش‌کار: تعداد 100 نمونه از مدفوع کودکان زیر 2 سال مبتلا به اسهال از شهر تهران و ورامین جمع آوری و به منظور ردیابی حضور روتاویروس a با استفاده از روش elisa مورد بررسی قرار گرفت. نمونه‌های مثبت بر روی خط سلولی ma-104 با چند پاساژ جداسازی و کشت شدند. سپس کلیه نمونه‌های مثبت (49 نمونه) با استفاده از روش seminested rt-pcr و پرایمرهای اختصاصی تعیین کننده ژنوتیپ‌های رایج گاوی مورد بررسی قرار گرفتند. نتایج: از 100 نمونه، 49 مورد در الایزا مثبت تشخیص داده شدند. 8 نمونه در مرحله اول seminested rt-pcr باند مربوط به قطعه مورد نظر را نشان دادند و در دور دوم، در دو نمونه اخذ شده از شهر ورامین، نتایج مثبت بود و وجود قطعه vp7 گاوی در یکی g6 و در دیگری دو قطعه g6 و g8 تشخیص داده شد که نشان از عفونت همزمان حداقل با دو جدایه روتاویروس انسانی نوترتیب دارد. هر 6 نمونه‌ منتخب الایزا مثبت که به روی خط سلولی ma-104 برده شده بودند، پس از 54 بار پاساژ متوالی آثار تخریب سلولی (cpe) را نشان دادند و زنده بودن روتاویروس‌های نمونه‌های منتخب این مطالعه تایید گردید. نتیجه‌گیری نهایی: نتایج این مطالعه بیانگر وجود نوترتیبی روتاویروس‌های انسانی با روتاویروس گاوی است و نشان می‌دهد که در صورت ظهور تیپ‌های جدید انسانی، به دلیل تفاوت سویه نوترتیب جدید در پروتئین ایمنوژن، امکان غالب شدن آن و در نهایت، همه گیری و تلفات چه بسا قابل ملاحظه‌ای امکان خواهد داشت که به مطالعات بیشتر و پایش مداوم نیاز دارد.

Study on the Reassortment and the Presence of G genotypes of Bovine Group A Rotaviruses in the Human Rotaviruses in Tehran

BACKGROUND: Rotavirus Group A is one of the most important causes of gastroenteritis as it is isolated from 30 to 50% of infant diarrhea from humans and other animals. G genotype of the virus is determined by gene sequence of a surface protein of the virus (VP7), one of the most important factors in inducing immunity against the virus which acts very specific to each genotype. OBJECTIVES: In the present study the presence of common bovine rotavirus genotypes A was examined in human rotavirus population. METHODS: A total of 100 stool samples from children under 2 years of age in Tehran and Varamin were collected and to track the presence of rotavirus A, were evaluated using ELISA method. Positive samples were isolated and cultured on the MA104 cell line after several passages. The positive samples (49 samples) were determined to be the G type using seminested RTPCR and primers specific for bovine common genotype. RESULTS: From 100 samples, 49 were positive in ELISA. Eight samples in the first semi nested RTPCR showed the desired rotavirus bands and in the second round, the results were positive for the presence of bovine VP7 in two samples taken from Varamin, in one sample, G6, and in another sample, two genotypes of VP7, G6 and G8 were detected, indicating infection with at least two strains of human rotavirus reassortant. Six of the ELISA selected positive samples that were taken to the cell line MA104, showed effects of cell damage (CPE) after 45 consecutive passages, demonstrating proliferation of the rotaviruses of this study and so, their viability was confirmed. CONCLUSIONS: The results of this study indicate reassortment between bovine and human rotaviruses and show that in case of occurrence of bovine and human rotavirus infection and the emergence of new human type, due to reassortment strain differences in protein immunogen it is possible to overcome due to lack of maternal immunity in the human population and low efficiency of current vaccines and, ultimately, epidemic and considerable losses may occur. Hence, more research is warranted.