بیان ژن‌های آپوپتوز در لنفوسیت‌های گاوی در پاسخ به مایع کیست هیداتید

زمینۀ مطالعه:  هیداتیدوز عفونتی با انتشار جهانی است که توسط سستودهای جنس اکینوکوکوس ایجاد می‌شود. توانایی زنده ‌ماندن انگل به مدت طولانی در میزبان نشان ‌دهنده آن است که انگل دارای استراتژی‌هایی برای فرار از سیستم دفاعی میزبان است. مرگ‌های ایجاد شده توسط عفونت‌های انگلی اغلب در اثر آسیب‌های بافتی است که نتیجه یک نوع مرگ سلول میزبان است که تحت عنوان آپوپتوز شناخته شده است. بنابراین مهم است که نقش آپوپتوز را که توسط انگل ایجاد و یا کنترل می‌شود را کشف و بشناسیم. هدف: بررسی اثر سیتوتوکسیسیتی، القاء آپوپتوز و سازوکار القاء آپوپتوز مایع هیداتید گاوی بر روی لنفوسیت‌های گاو به عنوان سلول‌های کارآمد ایمنی علیه اکینوکوکوس گرانولوزوس می‌باشد. روش‌کار: در این پژوهش ابتدا اثر سیتوتوکسیسیتی مایع هیداتید گاوی بر روی لنفوسیت های گاو با روش mts بررسی شد. سپس میانگین بیان ژن‌های آنتی‌آپوپتوتیک bcl2 و پروآپوپتوتیک bax و شاخص آپوپتوزcaspase 3در لنفوسیت‌های گاوی تیمار شده با مایع کیست هیداتید بارور و غیربارور با روش real time pcr اندازه‌گیری شد. نتایج: میانگین زیستی لنفوسیت‌ها در گروه‌های تیمارشده با مایع کیست هیداتید بارور و غیربارور نسبت به یکدیگر و گروه کنترل اختلاف معنی‌دار (0.05 >p) داشت. میانگین بیان ژنbax در لنفوسیت‌های تیمار شده با مایع کیست بارور در مقایسه با لنفوسیت‌های تیمار شده با مایع کیست غیربارور و کنترل اختلاف معنی دار (0.046= p) داشت. اگرچه میانگین caspase 3در این گروه بالاتر بیانشد ولی اختلاف معنی دار نبود. همچنین بیان ژن bcl2 در لنفوسیت‌های تیمار شده با مایع کیست بارور در مقایسه با غیربارور و کنترل، پائین‌ و غیرمعنی دار به‌ دست آمد. نتیجه‌گیری نهایی: این بررسی‌ها تعیین می‌کند که مولکول‌های مایع کیست هیداتید قادر به ایجاد آپوپتوز در سلول‌های ایمنی میزبان در محیط آزمایشگاهی می‌باشند و انگل با مهار پاسخ ایمنی میزبان از مسیر آپوپتوز، توانایی زنده‌ ماندن به مدت طولانی را در بدن میزبان دارد.

Apoptosis Genes Expression in Bovine Lymphocytes in Response to Fertile and Infertile Hydatid Cyst Fluid

BACKGROUND: Hydatid cyst is an infection with global distribution that is caused by the larval stage of the tapeworm of Echinococcus. The longterm survival of the hydatid in the host shows the parasite has advanced highly effective strategies for escaping the host defense. Deaths are caused by parasitic infections which are often due to tissue damages that result in host cell death, this is known as apoptosis. So it is important to know the process and the role of apoptosis that is created or controlled by a parasite. OBJECTIVES: Investigation of cytotoxicity effect, induction of apoptosis and mechanism of induction of apoptosis of cattle hydatid fluid on bovine lymphocyte cells as efficient cells of immunity were studied. METHODS: In this study, the cytotoxicity effect of bovine hydatid fluid (HF) on lymphocyte cells was investigated as effective immune cells against Echinococcus granulosus by MTS method. Then the mean of the expression of caspase3, Bax and Bcl2 genes in bovine lymphocytes treated/untreated was determined with fertile and infertile hydatid cyst fluid using Real Time PCR method. RESULTS: The viability mean of lymphocytes was significantly lower in the fertile HF treated lymphocytes compared to both infertile HFtreated lymphocytes and cell control. Bax gene expression was significantly (P=0.046) higher in the fertile HFtreated lymphocytes compared to both infertile HFtreated lymphocytes and cell control. Although Caspase 3 was higher in this group, the difference was not significant. Also, expression of Bcl2 gene in fertile fluid treated lymphocytes was found to be lower than that of infertile and control. CONCLUSIONS: Present study indicates that hydatid cyst fluid molecules can probably induce apoptosis in immune cells in vitro and the parasite’s ability to stay alive for a long time in the host by controlling the host immune response from the apoptosis pathway.