تمییز آلل‏ های Mhc سگ (Dla-Drb1) با روش تحلیل دقیق دمای شکافت Dna

زمینه مطالعه: نقش مهم مولکول‏های مجتمع عمده پذیرش بافتی (mhc) اتصال به پپتید‌های پادگنی و عرضه آن‌ها به لنفوسیت‏های t است. از اینرو تنوع mhc با حساسیت و یا مقاومت در برابر بسیاری از بیماری‏های عفونی و بیماری های خودایمن مرتبط است. یک روش نوین بررسی تنوع ژنتیکی، تحلیل دقیق دمای شکافت (hrm-high resolution melting) dna است که می توان آنرا برای بررسی تنوع mhc به کار برد. هدف: تمییز آلل‏ های mhc سگ (dla-drb1) با روش تحلیل دقیق دمای شکافت dna روش کار: تعداد 40 نمونه خون از سگ های ارجاعی به بیمارستان دام‏های کوچک دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران جمع آوری گردید. پس از استخراج dna و افزوده سازی اگزون دوم ژن dla-drb1، تحلیل hrm و منحنی ذوب صورت گرفت. برای تطبیق الگوهای hrm با توالی نوکلئوتیدی آلل ها، از روش تعیین توالی مستقیم استفاده شد. نتایج: بر اساس تنوع مشاهده شده در نتایج hrm و منحنی ذوب، 40 نمونه به 8 ژنوتیپ (a تا h) قابل تقسیم‏بندی بودند. بیشترین فراوانی مربوط به تیپ a (25.00 %) و سپس تیپ c و e (هر کدام 15.00 %) بود. در مجموع 82.5 % نمونه ها هتروزیگوت و 17.5 % نمونه ها هوموزیگوت بودند. نتیجه گیری: مطالعه حاضر اولین مطالعه‏ای است که برای تایپیگ آلل‏های ژن dla-drb1 از تکنیک hrm استفاده شده است. تطبیق نتایج hrm با توالی آلل ها نشان داد که این روش می‏تواند برای تفکیک آلل‏های dla-drb1 به کار رود.