غربالگری مقاومت به قارچ Verticillium Dahliae در ارقام امیدبخش و کلکسیون ژنوتیپ‌های بومی زیتون ایران

بیماری پژمردگی ورتیسیلیومی در اثر قارچ verticillium dahliae یکی از مخربترین عوامل بیماری زای زیتون دردنیا ومناطق مختلف زیتون‌کاری ایران محسوب می‌شود. در این تحقیق عکس‌العمل 15 رقم امید بخش و 15 ژنوتیپ بومی زیتون نسبت به قارچ عامل بیماری بررسی شد. نهال‌های نه ماهه زیتون برای ارزیابی کمی قارچ عامل بیماری و تعیین میزان حساسیت یا مقاومت نسبت به بیماری با ‌روش فرو بردن ریشه در زاد مایه انجام شد. میزان افزایش کمی dna قارچ موجود در نهال ها با استفاده از تکنیک real time pcr و سیستم sybr green همراه با آغازگرهای اختصاصی برای ژن بتا توبولین2 در فواصل زمانی صفر،2، 15، 45 و80 روز پس از مایه زنی، ارزیابی شد. ژنوتیپ های qg11، dd21، ps5 و رقم مانزانیلا به‌ترتیب بالاترین حساسیت را نسبت به سایر ارقام و ژنوتیپ ها در برابر بیماری داشتنند. ژنوتیپ‌های kh13، tts1، کد 5 لرستان و ds5 به‌ترتیب کم‌ترین غلظت dna قارچ در dna کل ریشه را به خود اختصاص دادند. علاوه بر این، در این تحقیق مشخص گردید نتایج روش متعارف ارزیابی مقاومت ارقام زیتون مبتنیبر ثبت علایم ظاهری بیماری با نتایج حاصل از کمیت سنجی قارچ با استفاده از real time pcr دارای هم‌پوشانی نسبتاً بالایی است به‌طوری که ارقامی که در روش ارزیابی متعارف  جزء ارقام مقاوم یا بسیار حساس طبقه‌بندی شدند، درروش ارزیابی ملکولی نیز در گروه‌های مشابهی قرار گرفتند. با توجه به‌دقت وحساسیت بالای روش ارزیابی ملکولی می‌توان از روش اخیر برای غربالگری منابع مختلف زیتون برای مقاومت به بیماری پژمردگی ورتیسیلیومی استفاده کرد.

Screening of promising olive cultivars and local genotypes for resistance to Verticillium dahliae in Iranian collection

Verticilliumwilt of olive (VWO) caused by fungus Verticillium dahliae, is one of the most important diseases of olive worldwide. The response of 15 promising olive cultivars and 15 local varieties was evaluated to the fungus. The olive saplings of each genotype were inoculated with suspension of the fungus using root dip method. The degree of susceptibility/resistance of each genotype was evaluated based on both morphological feature and quantification of fungus in the root system of different genotypes. Total DNA was extracted from root of saplings at different sampling intervals: 0, 2, 12, 45 and 80 days post inoculation. The gradual increase for DNA of fungus in saplings was quantified by Realtime PCR technique and utilizing of SYBR Green system with specific primer pairs for ßtubulin2 gene. Based on both morphological and quantitative Realtime PCR assays: QG11, DD21, treeNo2, PS5 and Manzanilla were highly susceptible and KH13, TTS1, DS5 code 5 Lorestan and DS5 were evaluated as resistant genotypes to the VWO. Moreover, we found parallel results for conventional method of screening (based on disease symptoms) and quantification of DNA in root system of olive by Realtime PCR technique. Olive genotypes evaluated as highly susceptible or resistant to the disease in conventional method showed the similar reaction to the fungus in QPCR method. This may suggest that conventional method of evaluation for resistance could be replaced by QPCR molecular method in high thropout screening of olive germplasm.