تعیین ویژگی‏های مولکولی و کاتالیتیکی آنزیم زایلاناز اسیددوست باسیلوس سابتیلیس K40b

در بررسی حاضر سویه باسیلوس سابتیلیسk40b از ریزوسفر برنج جدا و پتانسیل تولید آنزیم زایلاناز آن با استفاده از روش بیوشیمیایی ارزیابی شد. حضور ژن زایلاناز در سویه k40b به روش مولکولی ردیابی و پس از تعیین توالی در بانک ژن مرکز اطلاعات زیست فناوری ثبت شد. توالی این ژن شامل 563 نوکلیوتید است که یک رشته پپتیدی 187 اسید آمینه‏ای را کد می‏کند. مقایسه توالی ژن زایلاناز سویه مورد بررسی با توالی‏های مرجع نشان می‏دهد که آنزیم تولید شده توسط سویه باسیلوس سابتیلیس k40b متعلق به خانواده 11 گلیگوزید هیدرولاز است و بالاترین شباهت را به زایلانازهای باسیلوسی دارد. روش سطح پاسخ با استفاده از طرح مرکب مرکزی نیز به منظور تعیین دما و ph بهینه فعالیت کاتالیتیکی آنزیم زایلاناز تولید شده به کار گرفته شد. دامنه مورد بررسی متغیرهای دما و ph در این مطالعه به ترتیب 75-25 درجه سلسیوس و 5/8-5/4 بود. بر اساس نتایج حاصل از آنالیز واریانس، مدل درجه دوم به عنوان مدل مناسب برای پیش بینی متغیر پاسخ (فعالیت آنزیم زایلاناز) پیشنهاد شد. نتایج نشان می‏دهد که آنزیم زایلاناز تولید شده توسط سویه مورد بررسی در ph بین 2/5 تا 2/6 و دمای 50 تا 60 درجه سلسیوس بیشترین فعالیت را دارد. همچنین، بر اساس نتایج بهینه-سازی مشخص شد که ph قلیایی و دمای بیشتر از 70 و کمتر از 50 درجه سلسیوس نیز موجب کاهش قابل توجهی در فعالیت کاتالیتیکی آنزیم خواهد شد.