بررسی تاثیر سوپرناتانت پروبیوتیک لاکتوباسیلوس ساکئی در افزایش آپوپتوز و کاهش سلول‌های سرطانی mcf-7 از طریق مدولاسیون ژن های bax و bcl2

مقدمه: شواهد فزآینده‌ای نشان می‌دهد که القای آپوپتوز یک استراتژی مهم برای کنترل تکثیر بیش از حد سلول‌های سرطانی پستان است. در این مطالعه اثر سوپرناتانت باکتری پروبیوتیک لاکتوباسیلوس ساکئی بر میزان بیان ژن‌های آپوپتوزی (bax/bcl2) در رده سلولی mcf-7 سرطان پستان مورد بررسی قرار گرفت.روش بررسی: در تحقیق حاضر که به‌‌صورت تجربی انجام شد، با کشت رده سلولی mcf-7 در محیط کشت dmem محتوی 10% سرم جنین گاوی و تیمار سلول‌ها در غلظت‌های 1، 2، 3، 4 و 5 میلی‌گرم/میلی‌لیتر از سوپرناتانت ساکئی و انکوبه شدن در زمان 24، 48 و 72 ساعت، سایتوتوکسیسیتی با روش رنگ‌سنجی mtt طبق دستورالعمل کیت در هر سه زمان انکوباسیون مورد بررسی قرار گرفت. سلول‌های رده mcf-7 نیز با غلظتی از سوپرناتانت که سبب کاهش 50 درصدی بقای سلولی گردید (5 میلی‌گرم/میلی‌لیتر) برای بررسی بیان ژن‌های bax  و bcl2 ظرف مدت 72 ساعت انکوبه شدند. سپس میزان بیان ژن‌های bax و bcl2 از طریق آنالیز rt-real time- pcr مورد بررسی قرار گرفت.نتایج: نتایج حاصل از این تحقیق حاکی از آن است که توان زیستی سلول‌های رده‌ mcf-7 سرطان پستان، در مقایسه با گروه کنترل در دوز 5 میلی‌گرم/ میلی‌لیتر به پایین‌ترین مقدار خود می‌‌رسد. به‌علاوه تیمار سلول‌های رده‌ mcf-7 با دوز 5 میلی‌گرم/ میلی‌- لیتر سوپرناتانت لاکتوباسیلوس ساکئی و انکوباسیون آن برای مدت 72 ساعت، افزایش معنی‌دار میزان بیان ژن bax  (p-value=0/0033) و کاهش معنی‌دار میزان بیان ژن bcl-2 (p-value= 0/0278) را نشان داد.نتیجه‌گیری: نتایج بیان می‌کنند که سوپرناتانت لاکتوباسیلوس ساکئی قادر است از طریق القای مسیر آپوپتوزی توان زیستی سلول‌های سرطان پستان را کاهش دهد.

evaluation of lactobacillus sakei probiotic supernatant’s effectiveness in promoting apoptosis and decreasing breast cancer mcf-7 cancerous cells through modulation of bax and bcl2 genes

introduction: accumulating evidence has revealed that inducing apoptosis is an important strategy to control excessive breast cancer cell proliferation. in this study, the supernatant effect of the probiotic strain of lactobacillus sakei on expression level of apoptosis-related genes (bax/bcl2) in breast cancer cell line (mcf-7) was investigated.methods: in the experimental study, mcf-7 breast cancer cells were cultured in dmem medium with 10% bovine serum. the cells were treated in 1, 2, 3, 4 and 5 mg/ml concentrations of sakei supernatant and incubated at 24, 48 and 72 hours. the mtt assay was used to measure cytotoxicity effect according to kit manufacturer’s protocol in all three incubation times. mcf-7 cells with concentration of sakei supernatant at ic50 point (5 mg / ml) to examine the expression of genes bax and bcl2 were incubated for 72 hours. real-time pcr was performed to analyze the changes in the expression of bax and bcl2 genes.results: the results of this study indicated that bioavailability of mcf-7 cell line reached the lowest value at concentration of 5 mg/ml compared to the control group. in addition, mcf-7 cell line treatment with lactobacillus sakei supernatant at a dose of 5 mg/ml and 72 h incubation time, showed significantly increased expression of bax (p-value= 0.0033) and significantly decreased expression of bcl-2 (p-value= 0.0278).conclusion: the results indicate that lactobacillus sakei supernatant can reduce the bioavailability of breast cancer cells by inducing apoptosis pathway.