جداسازی و ارزیابی کلاژن از پوست ماهی (هوور دم‌دراز- thunnus tonggol) به عنوان یک ماده بیولوژیک برای مهندسی بافت پزشکی

کلاژن دارای کاربردهای فراوانی در زمینه داروسازی و پزشکی، تهیه محصولات بهداشتی و آرایشی و صنایع غذایی می‌باشد و در سال‌های اخیر توجه زیادی به جداسازی کلاژن از موجودات دریایی شده است، که علت آن عدم محدودیت استفاده از این نوع کلاژن در رژیم غذایی، عدم انتقال و کاهش خطر ابتلا به بیماری‌های مسری و محدودیت‌های شرعی می‌باشد. هم‌چنین کلاژن ماهی، به لحاظ حلالیت فوق‌العاده زیاد آن در اسید رقیق در مقیاسه با کلاژن پستانداران و ماکیان منحصر به فرد است. هدف از این مطالعه بررسی جداسازی و ارزیابی کلاژن از پوست ماهی (thunnus tonggol) به عنوان یک ماده بیولوژیک برای مهندسی بافت پزشکی بود.روش بررسی: کلاژن با استفاده از اسید استیک از پوست ماهی جداسازی و با استفاده از روشهای sdspage (sodium dodecyl sulfate polyacrylamidegel electrophoresis)، ftir (fourier transform infrared spectroscopy)، اسپکتروفوتومتر uv و hplc (high performance liquid chromatography)، نوع و میزان اسیدهای آمینه آن بررسی شد. در پایان رشد و سازگاری سلول‌های فیبروبلاست انسانی بر روی کلاژن جداسازی شده مورد بررسی قرار گرفت.نتایج: کلاژن پوست ماهی، کلاژن نوع i است. تجزیه و تحلیل ftir وجود آرایش مارپیچی کلاژن را نشان داد و اسپکتروفتومتری uv نشان داد که کلاژن در 235 نانومتر جذب دارد. میزان کلاژن استخراج شده از پوست ماهی هوور17/3 درصد بود. در تجزیه و تحلیل اسیدآمینه کلاژن استخراج شده از پوست ماهی هوور، اسید آمینه گلایسین به عنوان اسید آمینه غالب بود. رشد و تکثیر سلول‌های فیبروبلاست انسانی بر روی کلاژن استخراج شده از پوست ماهی هوور مناسب بود. نتیجه‌گیری: نتایج نشان داد کلاژن ماهی می تواند یک منبع ارزان و در دسترس قابل استفاده در مهندسی بافت‌های پزشکی ‌باشد.

Isolation and Evaluation of Collagen from the Fish (Thunnus Tonggol) Skin: A Biological Material for Medical Tissue Engineering

Introduction: Collagen bears many applications in pharmacy and medicine, health and cosmetic products as well as food industry. In recent years, much attention has been paid to separation of collagen from marine organisms arising from the fact that its use in the diet is not restricted and triggers no risk of contagious diseases as well as religious restrictions. Moreover, fish collagen is unique in terms of its extremely high solubility in dilute acid on a scale with mammalian and chicken collagen. The purpose of this study was to investigate the isolation and evaluation of collagen from fish skin (Thunnus tonggol) as a biological material for medical tissue engineering.Methods: Acidsoluble collagen (ASC) was isolated from fish skin using acetic acid. The Thunnus tonggol skin collagen was extracted by acid and base methods and evaluated by PAGESDS, FTIR and UV spectrophotography and amino acid composition analysis. Results: The results, predicated on SDSPAGE and amino acid compositions, demonstrated that the fish skin collagen is of type I. Fourier transform infrared analysis also revealed helical compositions of both collagens. UV spectrophotometry in the Thunnus tonggol skin collagen indicated a maximum absorption of 235 nm. The amount of collagen extracted from the Thunnus tonggol skin turned out to be 17.3%. Through analysis of collagen amino acid extracted from the mentioned fish, glycine was predominant. The growth and proliferation of human fibroblast cells on the collagen extracted from the Thunnus tonggol skin was more than control.Conclusion: The results revealed that the fish collagen is an accessible and advantageous material for medical usage and tissue engineering.