عدم تاثیر پلاسمای رت‌های پیش شرطی شده، ایسکمی شده و ایسکمی-خونرسانی مجدد شده میوکاردی بر تمایز سلول‌های بنیادی مزانشیمی به کاردیومیوسیت

مقدمه: مطالعات متعدد نشان داده‌ اند که پلاسمای غنی شده سبب محافظت سلول‌های میوکاردی در برابر ایسکمی می‌شود. در این مطالعه اثر پلاسمای غنی شده رت‌های پیش شرطی شده، ایسکمی شده و خونرسانی مجدد شده میوکاردی بر تمایز سلول‌های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان (bone marrow mesenchymal stem cells, bmmsc) به کاردیومیوسیت‌ها مورد ارزیابی قرار گرفت.روش بررسی: در این مطالعه تجربی آزمایشگاهی bmmsc‌ها از استخوان فمور رت‌های نر بالغ نژاد ویستار با محدوده وزنی 300-250 گرم استخراج گردید. bmmsc‌های پاساژ سوم به شش گروه تقسیم شدند: گروه 1) کنترل، گروه2) آزاسایتیدین، گروه 3) دریافت‌کننده آزاسایتیدین و پلاسمای غیر ایسکمی، گروه 4) دریافت‌کننده آزاسایتیدین و پلاسمای پیش شرطی شده، گروه 5) دریافت‌کننده آزاسایتیدین و پلاسمای ایسکمی شده، گروه 6) دریافت‌کننده آزاسایتیدین و پلاسمای خونرسانی مجدد شده. در تمام گروه به جز گروه 1، یک دوز آزاسایتیدین (10 میکرومول) برای یکبار به مدت 24 ساعت اضافه شد تا تمایز به کاردیومیوسیت‌ها را شروع نماید. هر زمان که محیط کشت تعویض می‌شد، پلاسما (25 mu;g/ml) نیز به محیط کشت اضافه می‌شد. در نهایت، میزان بیان ژن‌‌های beta;mhc، دسمین و تروپونین i میوکاردی با استفاده از روش qrtpcr مورد ارزیابی قرار گرفت.نتایج: بیان ژن‌های beta;mhc، دسمین و تروپونین i میوکاردی در تمام گروه‌های دریافت‌کننده آزاسایتیدین (2 تا 6) به‌طور معناداری افزایش یافت (p<0.01). تفاوت معناداری در بیان ژن‌های beta;mhc، دسمین و تروپونین i میوکاردی و هم‌چنین زمان دابلینگ تایم و مهاجرت بین گروه‌های دریافت‌کننده پلاسما (3 تا6) با گروه 2 یعنی آزاسایتیدین به تنهایی وجود نداشت (p>0.05). نتیجه‌گیری: یافته‌ها نشان دادند که پلاسمای جمع‌آوری شده در زمان پیش شرطی شدن ایسکمی، ایسکمی و خونرسانی مجدد تاثیری بر میزان تمایز bmmsc‌ها به کاردیومیوسیت‌ها در حضور آزاسایتیدین ندارد.

Lack of effect of plasma of myocardial preconditioned, ischemic and ischemic-reperfused rats of myocardium on differentiation of mesenchymal stem cells into cardiomyocytes

Introduction: Numerous studies have shown that enriched plasma protects myocardial cells against ischemia. The aim of this study was to evaluate the effect of rat enriched plasma by preconditioning, ischemia, and reperfusion on the differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells (BMMSC) into cardiomyocytes.Methods: In this experimental and laboratory study, BMMSCs were extracted from the femur bone of male Wistar rats weighting 250300 g. BMMSCs of the third passage were divided into six groups according to the type of plasma received: 1) control, 2) azacytidine, 3) azacytidine and nonischemic plasma recipient, 4) azacytidine and preconditioned plasma recipient , 5) azacytidine and ischemic plasma recipient 6) azacytidine and plasma reperfusion recipient groups. In all groups except group 1, to initiate cardiomyocyte differentiation, BMMSCs were exposed to azacytidine (10 mu;M) for 24 hours. Plasma (25 mu;g / ml) was added to the culture medium each time the culture medium was changed. After 21 days, the expression level of myocardial beta;MHC, desmin, and troponin I genes was assessed using qRTPCR.Results: The expression of myocardial beta;MHC, desmin, and troponin I genes was significantly increased in all groups received azacytidine (groups 2 to 6) (P<0.01). There was no significant difference in the expression of myocardial beta;MHC, desmin, and troponin I genes, the doubling time, and migration between the plasma receiving groups (groups 3 to 6) compared to the group 2 (P>0.05).Conclusion: The findings of present study showed that the plasma collected during ischemia, ischemiareperfusion, and ischemia preconditioning had no effect on the differentiation of BMMSCs into cardiomyocytes in the presence of azacytidine.