بررسی رشد سلول‌های بنیادی جنینی ‌تمایزیافته بر روی بستر پلیمری متخلخل بهینه شده با استفاده از سیستم فازی

مقدمه: تخریب ماکولار بر اثر افزایش سن یکی از بیماری ‌های شبکیه است که در آن سلول ‌های رنگدانه اپی تلیوم تخریب شده و منجر به نابینایی می ‌شود. درمان ‌های موجود تنها به کاهش فرآیند پیشرفت بیماری منجر می‌ شود. در این مطالعه، سلول ‌‌های بنیادی جنین انسانی تمایزیافته به سلول ‌های اپیتلیوم رنگدانه شبکیه چشم بر روی یک داربست پلی کاپرولاکتون کشت داده شدند.روش بررسی: بهینه‌سازی قطر داربست های تولیدی به روش الکتروریسی، با استفاده از روش فازی برای نخستین بار انجام گرفت. به منظور بهبود چسبندگی و تکثیر سلولی، پارامترهای مربوط به روش هیدرولیز قلیایی بهینه شد و سطح آب گریز داربست اصلاح گردید. پس از انجام آنالیزهای آزمایشگاهی، سلول ‌ها بر روی گروه ‌های مختلف داربست کشت داده شدند. آنالیزهای in vivo صورت گرفت و رشد سلول ‌ها بر روی داربست ‌ها مشاهده شد.نتایج: پارامترهای بهینه برای داربست براساس مدل فازی به ترتیب 18/1 کیلوولت برای ولتاژ، 0/07 گرم بر میلی‌‌لیتر برای غلظت محلول و 115 نانومتر برای قطر داربست به دست آمد. پارامترهای زمان غوطه‌ور ساختن داربست در محلول قلیایی و غلظت به ترتیب 97 دقیقه و 3/7 مولار، اندازه‌گیری شد. داربست اصلاح سطح شده درصد تخریب‌پذیری و جذب آب بالاتری داشت. نتایج آزمونmtt بر روی داربست ها نشان داد که گروه داربست با اصلاح سطح بیشترین میزان زنده مانی و تکثیر سلولی را پس از گذشت هفت روز داراست. نتایج‌ حاصل از تصاویر میکروسکوپ الکترونی روبشی این یافته را پس از گذشت حدود دو ماه تایید کرد. علاوه بر این، نتایج آزمون ایمونوسیتوشیمی نشان دادند که سلول ‌ها پس از گذشت این زمان، ماهیت rpe و اپیتلیومی بودن خود را حفظ کردند.نتیجه‌گیری: براساس نتایج به دست آمده، داربست هیدرولیزشده بستر مناسبی برای تکثیر سلول است و می تواند گزینه مناسبی برای درمان amd باشد.

Investigation of Differentiated Embryonic Stem Cells Growth on Optimized Porous Polymeric Bed with Fuzzy System

Introduction: Agerelated macular degeneration (AMD) is one of the retina diseases in which retinal pigment epithelium cells are degraded and lead to blindness. Available treatments only slow down the progression of it. In this study, human embryonic stem cells (hESCs) differentiated into retinal pigment epithelium cells were cultured on a polycaprolactone scaffold.Methods: The optimization of the diameter of the produced scaffolds by electrospinning method was done using the fuzzy method for the first time. To improve cell adhesion and proliferation, related parameters to alkaline hydrolysis method were optimized and hydrophobic surface of scaffold was modified. After in vitro analysis, cells were cultured on different groups of scaffolds. In vivo analyses were done and cells culture on scaffolds observed.Results: The optimal parameters for the scaffold based on the fuzzy model were 18.1 kV for voltage, 0.07 g / ml for solution concentration and 115 nm for scaffold diameter, respectively. The immersion time of the scaffold in alkaline solution and concentration of solution were measured 97 min and 3.7 M, respectively. The treated scaffold had a higher degradation rate and water adsorption. MTTAssay results showed that scaffolds with modified surfaces had a higher amount of cell viability and proliferation after 7 days. SEM image results confirmed this finding after almost two months. Additionally, the results of ICC test showed that after passing this time, cells kept their RPE and epithelium.Conclusion: Based on the results, the hydrolyzed scaffold is a suitable substrate for cell proliferation and can be a good option for AMD treatment.