کلون ‌سازی و بررسی بیان ژن ureg به عنوان کاندیدای واکسن ژنی علیه هلیکوباکتر‌‌پیلوری

مقدمه: هلیکوباکتر پیلوری، نوعی باکتری گرم منفی است که جمعیت زیادی از جوامع انسانی را در سراسر جهان دچار کرده است. اوره آز هلیکوباکتر پیلوری برای بقای آن در معده ی انسان ضروری است و ژن ureg یکی از مهم ترین عوامل مهم بیماریزایی آن است.هدف: کلون سازی ژن ureg برای ایجاد واکسن ژنی علیه هلیکوباکتر پیلوری مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی، نخست از هلیکوباکتر پیلوری dna استخراج شد. تکثیر ژن ureg با استفاده از پرایمرهای ویژه این ژن انجام و فراورده pcr به روش کلون سازی t/a در وکتور ptz وارد شد. سپس، ژن ureg از درون وکتور ptz با آنزیم های xbai و sali برش داده شد و در وکتور بیانی pcineo، ساب کلون شد. وکتور نوترکیب pci-neo-ureg را به روش الکتروپوریشن وارد سلول cho کرده و بیان ژن ureg بر ژل sdspage مشاهده شد. نتایج: تکثیر و جداسازی ژن ureg هلیکوباکتر پیلوری به روش pcr با موفقیت انجام شد. نتایج نشان داد ژن ureg به ترتیب در وکتورهای ptz و pcineo به درستی کلون شده و سازواره فرجامین(نهایی) pci-neo-ureg تولید شده است. نتیجه وارد سازی سازواره نهایی در سلول cho نیز نشان دهنده بیان و ایجاد یک باند 23 کیلودالتونی روی ژل sdspage بوده است.نتیجه گیری: ژن ureg کلون سازی شده در وکتور بیانی pcineo توانایی بیان و تولید فرآورده پروتئینی اختصاصی این ژن در سلول جانوری cho را دارد. بنابراین، این سازواره ژنی را می توان به عنوان کاندیدای مناسبی برای بررسی های بعدی در مورد واکسن های نوترکیب علیه هلیکوباکتر پیلوری در الگوی حیوانی شناساند.