|
|
ساخت سازهpEGFP-ChEgTrp به عنوان مدل DNA واکسن چند اپیتوپی علیه اکینوکوکوس گرانولوزوس
|
|
|
|
|
نویسنده
|
احمدزاده مژگان ,اسمعیلی زاد مجید ,انگجی سید عبدالحمید ,طهماسب محمد ,محمدی سمیه ,مصری رقیه
|
منبع
|
journal of inflammatory diseases - 1394 - دوره : 19 - شماره : 4 - صفحه:4 -11
|
چکیده
|
زمینه: آلودگی با لارو انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس سبب بیماری هیداتیدوزیس در انسان و نشخوارکنندگان می شود. با توجه به شیوع بالای این آلودگی در ایران، مقابله با آن از لحاظ بهداشت جامعه اهمیت خاصی دارد.هدف: مطالعه به منظور تولید و ساخت سازه pegfp-chegtrp به عنوان مدل dna واکسن چند اپیتوپی علیه انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس انجام شد.مواد و روش ها: این مطالعه تجربی در سال 1392در موسسه تحقیقاتی واکسن و سرم سازی رازی کرج انجام شد. ابتدا اپیتوپ های تحریک-کننده سیستم ایمنی میزبان با استفاده از پایگاه اطلاعاتی iedb پیش بینی و توالی کد کننده آن ساخته شد. سپس این توالی با استفاده از واکنش pcr تکثیر شد. محصول pcr پس از هضم آنزیمی با آنزیم محدود کننده xhoi در وکتور pegfp-n1 کلون شد و باکتری حاوی پلاسمید نوترکیب با روش های مختلف از قبیل pcr colony، الکتروفورز آگارز ژل و توالی یابی بررسی گردید.یافته ها: تعداد 4 پپتید حاوی 10 اپیتوپ خطی در آنتی ژن egtrpپیش بینی شد. توالی نوکلیوتیدی کد کننده chegtrp با استفاده از پرایمرهای اختصاصی و با روش pcr تکثیر و قطعه ای شامل 270 جفت باز حاصل شد. قطعه مورد نظر وارد وکتور pegfp-n1 گردید و پلاسمید نوترکیب با روشcolony pcr و الکتروفورز آگارز ژل تایید شد. برای تایید نهایی، پلاسمید نوترکیب توالی یابی و به این ترتیب سازه ژنتیکی pegfp-chegtrp ساخته شد.نتیجه گیری: قطعه chegtrp به طور موفقیت آمیزی در وکتور pegfp-n1 کلون شد و این پلاسمید می تواند جهت ساخت dna واکسن استفاده شود.
|
کلیدواژه
|
اکینوکوکوزیس ,تروپومیوزین ,کلونینگ مولکولی ,واکسن های DNA ,Echinococcosis ,Tropomyosin ,Molecular Cloning ,DNA Vaccines
|
آدرس
|
دانشگاه خوارزمی, دانشجوی کارشناسی ارشد ژنتیک دانشکده علوم زیستی دانشگاه خوارزمی، تهران، ایران, ایران, موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، کرج، ایران, استادیار ژنتیک مولکولی موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، کرج، ایران, ایران, دانشگاه خوارزمی, استادیار بیوتکنولوژی دانشکده علوم زیستی دانشگاه خوارزمی، تهران، ایران, ایران, دانشگاه خوارزمی, استادیار ژنتیک دانشکده علوم زیستی دانشگاه خوارزمی، تهران، ایران, ایران, دانشگاه خوارزمی, دانشجوی کارشناسی ارشد ژنتیک دانشکده علوم زیستی دانشگاه خوارزمی، تهران، ایران, ایران, دانشگاه خوارزمی, دانشجوی کارشناسی ارشد ژنتیک دانشکده علوم زیستی دانشگاه خوارزمی، تهران، ایران, ایران
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Authors
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|