تولید آنزیم آلفاآمیلاز و بررسی برخی پارامترهای موثر بر تولید آن از باسیلوس لیکنی فورمیس PTCC1525

آلفا آمیلاز یک آنزیم خارج سلولی و یکی از آنزیمهای مهم صنعتی است که در صنایع نشاسته، غذایی، دارویی، نساجی. کاغذ، اکل سازی و شوینده ها کاربرد فراوان دارد. در این پژوهش تولید آلفاآمیلاز از باسیلوس لیکنی فورمیس ptcc1525( یک سویه جدا شده از خاک) و بهینه سازی شرایط تولید بررسی و مشخص شده است که ترکیبات محیط کشت تولیدی و شرایط کشت چون انواع منابع کربن و نیتروژن، نمکهای معدنی و عوامل فیزیکی روی تولید آلفاآمیلاز موثرند. نتایج نشان می دهد که تولید آلفا آمیلاز ذر محیط کشت شامل منابع کربن پلی ساکاریدی نسبت به دی ساکاریدی و منوساکاریدی افزایش بیشتری دارد و حداکثر تولید آن در مجاورت 1 درصد نشاسته محلول است و منابع نیترون آلی چون آرد سویا، پپتون، آب استیپ ذرت و عصاره مخمر در افزایش تولید آلفا آمیلاز موثر تر از منابع نیتروژن معدنی اند. همچنین تولید آن در مجاورت 5/2 درصد آرد سویا یا 1 درصد پپتون همراه با 4/0 درصد عصاره مخمر افزایش بیشتری دارد. تولید آلفا آمیلاز در مجاورت نمکهای معدنی شامل کلسیم کلرید (05/0 درصد)، منیزیم سولفات( 05/0 درصد)، منگنز سولفات( 005/0 درصد) و دی پتاسیم هیدروژن فسفات (1/0 درصد) افزایش نشان می دهد. همچنین تولید آلفا آمیلاز در دمای رشد 30 درجه سانتی گراد، ph محیط کشت برابر 7، دور تکاننده rpm 150 و 5 درصد تلقیح میکروبی ازمحیط پیش کشت به محیط تولیدی بیشترین میزان را نشان می دهد. بررسی روی تولید آلفا آمیلاز نشان می دهد که تولید آن وابسته به نرخ رشد سلولی است. بدین معنی که تشکیل آلفا آمیلاز از شروع رشد سلولی آغاز شده و به حداکثر تولید آن در زمان 27 تا 30 ساعت می رسد. آنزیم بهترین فعالیت را در 65 درجه سانتی گراد نشان می دهد و در 90 درجه سانتی گراد، 65 درصد فعالیت خود را داراست و حداکثر فعالیت آن در طیف ph برابر 5/7-6 با فعالیت بهینه در ph برابر 7 مشاهده می شود. تاثیر یونها نشان می دهد که فعالیت آنزیم بوسیله یون های کلسیم، منیزیم و منگنز تحریک می شود در صورتیکه روی، آهن، سدیم و پتاسیم بازدارنده اند.