جداسازی و شناسایی مولکولی باکتری‎های مولد لیپاز از پساب کارخانه فرآورده‌های گوشتی گل‌بهار خرم‌آباد

مقدمه: لیپازها، به ‌دلیل توانایی زیست کاتالیزوری در محیط‌های آبی و غیرآبی یکی از مهم‌ترین کاتالیزورها برای صنایع مختلف مانند شوینده، لبنیات و نساجی به‌ شمار می‌روند. غربال‌گری زیستگاه‌های مختلف برای شناسایی باکتری های مولد لیپاز و بهینه سازی پارامترهای فعالیت آن‌ها، تولید و استفاده موثر لیپازها را در صنایع مختلف تسهیل می‌کند. با توجه به اهمیت یافتن منابع جدید لیپاز، پژوهش حاضر با هدف جداسازی و شناسایی باکتری‌های مولد لیپاز و بررسی ویژگی‌های آن‌ها صورت گرفت.مواد و روش ها: در این مطالعه، نمونه پساب کارخانه فرآورده‌های گوشتی گل‌بهار خرم‌آباد از نظر وجود سویه‌های باکتریایی مولد لیپاز غربال‌گری گردید. جدایه های تولیدکننده لیپاز بر اساس خصوصیات مورفولوژیکی، بیوشیمیایی و توالی ژن 16s rrnaشناسایی شدند. پارامترهای محیط کشت مانند ph، دما و زمان به‌ منظور بهینه سازی فعالیت لیپازی متفاوت بودند.یافته ها: در این مطالعه تعداد سه ایزوله با فعالیت لیپازی بالا در اثر غربال‌گری پساب کارخانه فرآورده‌های گوشتی گل‌بهار خرم‌آباد شناسایی شدند. ایزوله‌هایی که بیشترین فعالیت لیپازی را نشان داده بودند با استفاده از بلاست توالی نوکلئوتیدی به‌دست‌آمده برای ژن 16s rrna به‌عنوانbacillus amyloliquefaciens شناسایی شدند. همچنین بیشترین میزان فعالیت آنزیم لیپاز برای ایزوله‌های شناسایی شده در 48 ساعت ثبت شد. علاوه‌ بر‌ این، در این پژوهش مشخص شد که حداکثر فعالیت لیپازی در دمای 45 درجه سانتی‌گراد و 8 ph = صورت می‌گیرد.بحث و نتیجه گیری: بر اساس یافته‌های این مطالعه مشخص شد که لیپاز‌های خارج سلولی ایزوله‌های باکتری b. amyloliquefaciens از نوع لیپازهای قلیایی بوده و دارای پایداری دمایی نسبتاً مناسبی هستند. با استخراج و تخلیص لیپاز خارج سلولی این ایزوله‌ها می‌توان از آن در صنایع مختلف بهره برد. همچنین با شناسایی و جداسازی ژن تولید کننده آنزیم لیپاز از ایزوله‌های مذکور می‌توان آن را در فرآیند مهندسی آنزیم وارد کرده و با ایجاد جهش‌های هدفمند، میزان فعالیت آن را به طور دلخواه تغییر داد.

isolation and molecular characterization of lipase producing bacteria from wastewater of golbahar meat products factory in khorramabad, iran

background: lipases are one of the most important catalysts in the detergent, dairy, and textile industries due to their biocatalytic activity in aqueous and nonaqueous media. lipaseproducing bacteria are effectively produced and used in various industries by screening their different habitats and optimizing fermentation parameters. the present study aimed to isolate and identify lipaseproducing bacteria and investigate their characteristics due to the importance of finding new sources of lipase.materials and methods: in the present study, wastewater samples from golbahar meat products factory in khorramabad, iran were screened for lipaseproducing bacterial strains. the lipaseproducing isolates were identified based on morphological and biochemical characterization as well as the 16s rrna gene sequence. the culture medium parameters such as ph, incubation time, and temperature were varied for optimization.results: three isolates with high lipase activity were identified by screening wastewater samples from golbahar meat products factory in khorramabad. the blast program indicated the highest sequence similarity of identified isolates of 16s rrna genes with bacillus amyloliquefaciens. maximum lipase activity was recorded at 48 h of incubation. moreover, the purified lipase demonstrated maximum activity at 45 °c and ph= 8.0.conclusion: the results of this study revealed that the extracellular lipases of bacillus amyloliquefaciens isolates are alkaline ones and have relatively good temperature stability which can be used in various industries. furthermore, the gene encoding lipase enzyme of these isolates can be useful in enzyme engineering and the lipase activity can be changed as desired by sitedirected mutagenesis.